徐长琼 ，李然 ，任秋芸 ，梅君 ，黎珊 ，黄会保，夏丽琼

（1.岳阳市妇幼保健院科研所，湖南岳阳 414000；2.汕头大学医学院，广东汕头 515000；3.岳阳市中医医院药剂科，湖南岳阳 414000）

“岳阳张氏正骨术”由张瑞林创立，历经百余年理论发展及实践验证，成为湖湘中医正骨的主流学派，2012 年被国家中医药管理局确定为第一批全国十三大骨伤学术流派传承工作室建设项目，2017 年获评“湖南省非物质文化遗产代表性项目”[1-4]。

“岳阳张氏正骨术”提倡内外相合用药，百余年来积累了多种有效秘方，自拟自制过张氏消肿定痛膏、接骨止痛胶囊等10 余种院内制剂，用于治疗急慢性软组织损伤，临床疗效显著，安全性良好。然而，张氏消肿定痛膏治疗骨伤科疾病的物质基础研究及其外用透皮吸收物质基础研究均未见文献报道，本项目拟使用大鼠离体皮肤，制备张氏消肿定痛膏透皮渗透液，通过UPLC-MS/MS和自建数据库等广泛靶向代谢组学研究平台，研究张氏消肿定痛膏透皮吸收物质基础，了解药物透皮吸收成分及相对含量，明确张氏消肿定痛膏发挥药效作用的物质基础。

1 仪器与试剂

超高效液相色谱（Shim-pack UFLC SHIMADZU CBM30A）；串联质谱（Applied Biosystems 6500 QTRAP）；BSA224S-CW 型电子分析天平[（赛多利斯科学仪器（北京）有限公司]；ⅩMTD-7000 磁力搅拌器（天津赛得利斯实验分析仪器制造厂）；甲醇、乙腈、乙醇为Merck 色谱纯试剂；标准品（BioBio-Pha/Sigma-Aldrich）；张氏消肿定痛膏由岳阳市中医院骨伤科提供。

2 方法

2.1 供试品的制备

张氏消肿定痛膏原药提取物的制备：取各张氏消肿定痛膏原药0.5 g，置15 mL 离心管中，加甲醇10 mL，超声提取1 h，加甲醇至刻度，摇匀，经0.22 μm微孔滤膜滤过，即得。……