洪 莉，郑 青，陈永香，吴 春，陈绵平（海口市妇幼保健院检验科，海口 570100）

急性肾损伤(acute kidney injury，AKI)是在儿童脓毒症中常见且严重的并发症，可延长患儿的住院时间及增加死亡率。中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（neutrophil gelatinaseassociated lipocalin, NGAL）及肾损伤分子-1（kidney injury molecule-1, KIM-1）是反映肾功能损伤的常用指标， 与AKI 发生有关，在AKI 的早期诊断中具有一定的价值[1]。微小核糖核酸（microRNA，miRNA）是一类长约22 nt 的小RNA 分子，其通过调节炎症反应、缺血再灌注损伤等过程，参与AKI 的发生发展[2-3]。近期的研究发现，miR-452-3p 在脓毒症并发AKI 患者中明显高于无AKI 患者，可能是脓毒症患者早期发现AKI 的有效生物标志物[4]。本研究对脓毒症并发AKI 患儿血清miR-452-3p，NGAL 及KIM-1水平进行检测，探讨三项联合预测AKI 患儿预后的价值。

1 材料与方法

1.1 研究对象 选取海口市妇幼保健院2018年1月～2020年12月收治的脓毒症并发AKI 患儿106例，其中男性65 例，女性41 例，年龄12 个月～14岁（6.73±1.65）岁。根据106 例患儿住院后28 天的预后情况，分为生存组71 例和死亡组35 例。纳入标准：①脓毒症诊断参考《儿童脓毒性休克诊治专家共识(2015 版)》[5]；②AKI 诊断参考2012《KDIGO 急性肾损伤临床实践指南》[6]。排除标准：①已存在慢性肾脏病史、免疫系统疾病及恶性肿瘤；②不能配合签署知情同意书。死亡组和生存组年龄、性别等一般资料比较差异无统计学意义（P>0.05）。

1.2 仪器和试剂 ABI 7500 型荧光定量PCR 仪，PCR 试剂盒，RNeasy 试剂盒，miRNA Easy 试剂盒和TRIzol 试剂盒均购自美国Qiagen 公司；离心机为北京医用离心机厂产品。NGAL 及KIM-1 试剂购自美国R&D 公司。

1.3 方法 采集静脉血5 ml，离心分离血清，在PCR 仪上检测miR-452-3p 水平。反应体系为20μl：TaqMan MicroRNA Assay 1.00μl，cDNA 1.33μl，TaqMan 2×Universal PCR Master Mix 10.00μl，ddH2O 7.67 μl；扩增条件为：95℃预变性10 min，95℃变性15 s，60℃复性60 s 进行45 个循环。另……