刘 鹏 王从容

1型糖尿病(type 1 diabetes mellitus,T1DM)是一种严重的自身免疫疾病，主要以T淋巴细胞介导的β细胞破坏为主要特征，可导致胰岛素分泌绝对不足，引发高血糖[1]。T1DM需终身使用外源性胰岛素，如治疗不及时或治疗不当会引起严重并发症，影响患者生活质量，甚至危及生命。目前临床上使用的胰岛素可有效降低血糖，从一定程度上减缓糖尿病患者并发症的发生及进展速度，但却无法从源头上遏制胰岛β细胞的损伤。因此，针对T1DM开发一种新的治疗方式尤为重要。近年来，干细胞治疗各个领域疾病的基础和临床研究备受关注。人脐带来源间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells, hUC-MSCs)由于其再生能力强、高可塑性及低免疫原性等特点被广泛应用于基础和临床探索性研究[2]。

动物和临床探索性研究均表明，hUC-MSCs单独或联合其他细胞有望改善T1DM[3～6]。然而，细胞在移植受体中的分布、迁移和分化尚不完全明确。采用示踪方法明确移植的细胞是否能归巢到受损器官是hUC-MSCs治疗T1DM发挥作用的关键因素之一。即往研究中，干细胞示踪的标记方法有很多，主要包括使用绿色荧光蛋白(green fluorescent protein, GFP)作为报告基因转入细胞，用假核酸分子Brdu标记，生物染料PKH26、CFSE、DiL、DiR等标记，以及直接检测受体组织中的人源基因序列的方法[4, 7～11]。其中，报告基因转染步骤较为复杂，且荧光强度随着细胞传代呈递减状态，因此，GFP标记法存在不够稳定、可实施性较差的问题[12]。另一种Brdu也是较为常用的细胞标记方法。但由于已凋亡的移植细胞释放出的Brdu可渗入周围任何处于细胞分裂S期的细胞，因此Brdu无法判断标记细胞是正在分裂的移植细胞还是宿主细胞[13]。……