李珍玲，那佈其，王雪妍，崔银姬，金雪梅，权春姬

皮肤鳞状细胞癌(cutaneous squamous cell carcinoma, CSCC)是起源于表皮或附属器角质形成细胞的一种恶性肿瘤，是非黑素瘤皮肤肿瘤致死的首要原因。基质细胞衍生因子-1(stromal cell derived factor-1, SDF-1)又称CXCL12，是由骨髓基质细胞产生的CXC类趋化因子，而CXCR4为其主要受体。近年研究证实，SDF-1和CXCR4广泛、特异地表达于多种细胞与组织中，尤其是在多种肿瘤的发生、增殖、分化和器官特异性转移中发挥重要作用[1-3]。尽管SDF-1/CXCR4在多种肿瘤中高表达，但其在CSCC组织中表达的研究较少。本实验采用免疫组化EnVision法检测SDF-1、CXCR4蛋白在CSCC、鲍温病(Bowen’s disease, BD)和癌旁正常皮肤组织中的表达，进一步探讨其在CSCC发生、发展中的作用。

1 材料与方法

1.1 一般资料选择2011年1月～2018年3月吉林省延边大学附属医院存档的手术切除的100例CSCC、32例BD、15例癌旁正常皮肤组织，另选取CSCC组织芯片(购自上海芯超生物公司)58点作为实验样本。158例CSCC中，男性83例，女性75例，年龄35～96岁，平均(72.03±13.53)岁。32例BD中，男性15例，女性17例，年龄52～85岁，平均(70.83±9.12)岁。所有患者术前均未行放、化疗。

1.2 主要试剂兔抗人SDF-1、CXCR4多克隆抗体购自北京博奥森生物公司和武汉伊莱瑞特生物公司，HRP标记山羊抗小鼠/兔二抗、PV 6000试剂盒、DAB显色剂购自北京中杉金桥生物公司。

1.3 免疫组化采用免疫组化EnVision法染色。染色步骤：3 μm厚常规切片，脱蜡至水，EDTA 9.0高压抗原热修复，3%过氧化氢阻断内源性过氧化物酶，10%正常山羊血清封闭后，滴加一抗SDF-1(稀释比1 ∶100)、CXCR4(稀释比1 ∶60)4 ℃过夜；次日PBS洗涤后加入二抗，37 ℃孵育50 min，DAB显色，苏木精复染，脱水，透明，中性树胶封固，镜下观察。以乳腺癌组织作为阳性对照，以PBS代替一抗作为阴性对照。……