黏膜相关淋巴组织淋巴瘤的分子病理诊断结果分析
2021-12-03张丽
张 丽
(郓城县人民医院病理科,山东 菏泽274700)
临床上,黏膜相关淋巴组织淋巴瘤(MALTL)多见于老年人,其发病率相对低下[1]。患者发病与自身免疫性疾病、病原体感染所致慢性炎症关系密切,在生物学行为与临床表现上类似于慢性炎症,其缺乏特异性诊断抗体,鉴别和诊断存在较大难度[2-3]。本文分析了黏膜相关淋巴组织淋巴瘤的分子病理诊断结果,现阐述如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选取我院2016年1月至2019年10月收治的MALTL患者50例,回顾性分析其相关资料,患者年龄为20~70(57.3±3.9)岁;男女比为21/29。病灶分布主要在胃部19例(38.0%)、乳腺1例(2.0%)、甲状腺4例(8.0%)、肺5例(10.0%)、眼附属器及眼眶6例(12.0%)、肠6例(12.0%)、唾液腺9例(18.0%)。标本获取方式:活检标本14个、局部切除标本20个、手术根治性切除标本16个。
1.2 方法
1.2.1 仪器与试剂 所用仪器:电泳仪、PCR扩增仪;PCR引物及扩增试剂盒、第二抗体MaxVision/HRP检测试剂盒、第一抗体lambda(Lamb14)、kappa(多克隆)、CD20、CD3、CD21、CK、CD10、BCL-2、Cyclin D1、CD5、CD23等。
1.2.2 测定方法 所有患者均制作石蜡包埋标本,实施免疫组织化学检测和IgH基因克隆性重排,具体为(1)免疫组织化学检测:取石蜡标本切片行蒸馏水洗净、水花、脱蜡等处理后,采用PBS冲洗液冲洗,3min/次,共3次。之后行相应抗原修复,再次同法冲洗。将冲洗液去除后,在室温下将一抗加入湿盒孵育1h,再次同法冲洗。将冲洗液去除后,将二抗(MaxVision/HRP试剂)滴加后,室温下湿盒孵育15min,再次同法冲洗,去除冲洗液,滴加DAB试剂显色,终止显色加入蒸馏水冲洗,木素复染,并脱水、封片。采用PBS液代替一抗作为阴性对照,测试试剂盒为MaxVision/HRP,正常淋巴结作为阳性对照。(2)IgH基因克隆性重排:采用PCR扩增处理石蜡包埋组织的DNA,取DNA样本6个/次,之后对PCR1扩增试剂进行配制,之后装入7个50μL微型管中,各为20μL,在1~6号管装入6个DNA样本,7号为空白阴性对照。……
