王凤霞，魏 萌，司丽娜，杨松鹤，程露阳，乔跃兵，马秀艳

(1.承德医学院,河北 承德 067000 2.承德医学院附属医院，河北 承德 067000)

乳腺癌是女性最常诊断出的癌症，在女性癌症相关死亡原因中位居第二[1]。在乳腺癌的分子分型中，以雌激素受体阳性(hormone receptor positive，HR+)者居多，约占 70%[2]。目前以手术切除和化疗辅助为主要治疗方式，但手术切除和化疗辅助治疗均会给患者产生严重的生理和心理创伤，寻求不同治疗方式和药物抑制乳腺癌肿瘤细胞的增殖及活力尤为重要[3]。有研究发现，内分泌治疗手段可通过降低或竞争性抑制肿瘤生长依赖的激素(主要为雌激素)或其受体，抑制肿瘤细胞增殖[4]。虽然内分泌治疗副作用较小，但会出现耐药现象，所以寻求新的药物尤为重要。因此，本文旨在研究一种由下丘脑分泌的神经内分泌肽-促性腺激素抑制激素(gonadotropin inhibitory hormone，GnIH)，通过与受体GPR147结合经下丘脑-垂体-性腺轴抑制促黄体生成素(luteinizing hormone ，LH)和卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone，FSH)的分泌和释放，调节内分泌系统。所以，本研究应用GnIH来探讨其是否对雌激素受体阳性乳腺癌的凋亡造成影响及作用机制。

1 材料与方法

1.1细胞培养:人乳腺癌细胞系MCF-7在含有10%胎牛血清和1%青链霉素的DMEM培养基中，于37℃、5%CO2常规培养，待细胞长满培养皿的80%～90%按1∶2～3进行传代，取细胞对数生长期进行相关实验。

1.2药物及其配置:RPRF-3规格1g，购于Tocris Bioscience，U.K。将1g药物溶于0.5mL PBS中配成2mg/mL的母液，每15μL分装于EP管-20℃避光保存。15μL药物溶液溶于培养基用0.22μm的无菌过滤器过滤，获得10000ng/mL的GnIH药物溶液，倍比稀释配置成0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL、1000ng/mL的GnIH药物溶液。RF9规格1mg，购于MedChemExpress(Monmouth Junction,NJ,USA)。……