王彩肖，任风芝，陈若尘，张向彬，张 彦，高彩杰，刘建芬，李丽红

(1 华北制药华坤河北生物技术有限公司，河北 石家庄 050000；2 华北制药集团新药研究开发有限责任公司，河北 石家庄 050000)

蜂毒是工蜂毒腺分泌的一种具有芳香气味的成分复杂的混合物，主要含有蛋白质多肽类、酶类、生物胺类和其它物质，其中蜂毒肽约占蜂毒干重的50%，是蜂毒中主要功能物质[1]。蜂毒具有丰富的生物活性物质，是天然药物开发利用的良好资源，被广泛应用于风湿病、关节炎、抗肿瘤、免疫调节等疾病的治疗[2]，但因其结构复杂易引起药物稳定性的问题[3]，因此需要采用不同的分析方法研究不同来源的蜂毒在蛋白多肽组成上的差异，以期为今后蜂毒的开发利用奠定基础。

聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)方法采用银染的方法进行分离[4]，银染法分辨率高，可以识别0.5 mg/kg以上的不同蛋白，这样可以准确识别出不同的样品中的蛋白分布。分子排阻色谱-高效液相色谱法(SEC-HPLC)可以定量蛋白质的分布及纯度，检测灵敏度高、速度快[5-6]。质谱分析具有高灵敏、高准确、高通量特性，为蛋白质学领域提供了高质量的研究分析手段，目前已有报道应用高分辨质谱进行蛋白质的分析，证明高分辨质谱有其强大的高分辨率和高性能，适用于肽段和蛋白质的组学分析[7-8]。

本研究拟采用不同的分析手段，包括聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)、分子排阻色谱-高效液相色谱法(SEC-HPLC)、高分辨率质谱法(HRMS)分别对4个不同来源的粗蜂毒样品进行蛋白多肽组分的差异性分析，及利用高效液相色谱法(HPLC)分析其蜂毒肽含量的差异性，从而希望能为后期蜂毒的开发利用提供参考。……