2019-nCoV检测方法的研究进展
2021-11-28陈立娥王延飞
陈立娥 王延飞
滨州医学院附属医院 山东 滨州 256603
新型冠状病毒(2019-nCoV)肺炎疫情爆发以来,截至2020年6月6日,全球累计确诊病例为6 766 314例,累计死亡人数392 449人,与严重急性呼吸综合征(SARS)和中东呼吸综合征(MERS)相比,其传染性更强、传播速度更快,危害极其严重。
2019-nCoV属于冠状病毒亚科β属,是一种有囊膜的单股正链RNA病毒,其基因组长为29 881碱基,编码为9 860个氨基酸,具有4个结构蛋白,包含12个蛋白编码区/开放读码框,其中开放读码框lab(open reading frame lab,ORFlab)、核壳蛋白(nucleocapsid protein,N)基因和囊膜蛋白(envelope protein,E)基因区域高度保守,因此常被设计作为引物和探针的结合位点[1]。张永振课题组对其进行了病毒分离测序并公开结果后,各国对病毒的研究逐渐深入[2]。面对新冠病毒感染人数的逐渐增多,亟需更快、更准确的新冠病毒检测技术。检测技术中,病毒分离是病毒检测的金标准,但其耗时长,检测难度高,不适用临床检测工作[3],而CT诊断不适合实验室检测。根据目前临床使用和实验证据,对新冠病毒检测的核酸检测、免疫检测、联合检测等多种临床使用和最新实验室方法进行分析总结,以期对新冠病毒的防控和人群筛查提供参考。
1 核酸检测技术
1.1 测序技术 第二代基因测序技术能够在短时间内实现高通量的未知基因组测序。2019-nCoV便是通过患者的呼吸道分泌物提取病毒RNA,构建cDNA文库进行高通量测序,随后进行基因组比对分析,从而确定为一种新型的冠状病毒。基因测序的优势是:能确定未知样本的序列,这在疫情爆发初期具有极大价值;……
