高世华 李植锋 蔡键锋

肺癌根据组织形态学特征可分为小细胞肺癌(small-cell lung cancer, SCLC)和非小细胞癌(non-small-cell lung ancer, NSCLC)，其中SCLC占据肺癌的15%～20%，与NSCLC比较，SCLC的侵袭性更强、早期转移率更高、预后效果更差[1]。SCLC对化疗较为敏感，第一疗程治疗后症状通常能得到改善，但很快会产生多药耐药性，导致其预后依然欠佳，中位总生存期不足6个月[2]。因此，探究增强SCLC对化疗药物的敏感度具有重要意义。随着科技的发展，多种细胞死亡形式被逐渐发现，包括细胞坏死(necrocytosis)、细胞凋亡(apoptosis)、细胞自噬(autophagy)以及细胞焦亡(pyroptosis)等。其中，细胞焦亡是一种介于凋亡与坏死之间的死亡方式，发生速度快，可诱发机体强烈的炎性反应。Gasdermin蛋白E(gasdermin E, GSDME)是细胞焦亡的最终执行蛋白，同时其剪切活化也是焦亡发生的标志[3]。由于GSDME可介导化疗药物引起的组织损伤，肿瘤中GSDME的表达量较高，此肿瘤可能对化疗药物更为敏感[4]。紫杉醇(paclitaxel，PTX)是一种有丝分裂抑制剂，是近年来最有效的广谱化疗药物之一，治疗晚期NSCLC有效率高达20%～42%[5]。本研究拟探讨过表达GSDME在紫杉醇治疗SCLC中的增敏作用及其可能的分子机制。

材料与方法

1.组织标本、细胞系和主要试剂：人小细胞肺癌细胞株(H69、H146、H209、H446、H1688、H2227)、人支气管上皮细胞株(16HBE)、过表达GSDME的H69细胞株(H69-GSDMEhight)购自广州赛业生物科技有限公司；RPMI-1640培养基、胎牛血清、青链霉素混合液(×100)购自美国 Gibco公司；p53通路抑制剂(PFT-α)、caspase3抑制剂(Ac-DEVD-CHO, DEVD)购自美国Selleck公司；GSDME、β-actin多克隆抗体购自上海圣克鲁斯生物技术公司；通用RT-PCR试剂盒、LDH细胞毒性试剂盒、CCK-8试剂盒购自北京索莱宝科技有限公司。

2.细胞培养：使用含10%小牛血清、1%青链霉素双抗的RPMI-1640培养基作为完全培养液，培养于37℃、5%CO2培养箱中。……