龚建明 林 琪

卵巢癌是女性生殖器官常见的恶性肿瘤之一，病死率占各类妇科肿瘤的首位，由于缺乏有效的早期诊断方法，卵巢癌患者确诊时约2/3已为晚期。现临床上出现耐药的患者日益增多，且化疗药不良反应较多，对于晚期卵巢癌患者难以取得满意的疗效。

告达庭是一类传统中药具有悠久历史，现已被证明具有较强的抗肿瘤活性，其对宫颈癌、肺癌、肝癌等多种恶性肿瘤均有较明显的抑制作用，其可通过诱导肿瘤细胞凋亡，抑制血管内皮生长因子的表达抑制肿瘤的生长与扩散[1，2]。但其具体作用机制尚不明确。本实验探讨告达庭对卵巢癌增殖凋亡的影响及其作用机制，为告达庭应用于临床治疗卵巢癌提供实验基础。

材料与方法

1.材料：人卵巢癌细胞株SKOV3购自中科院上海细胞库。告达庭标准品(纯度大于98%)购自深圳美荷生物科技有限公司；CCK-8试剂盒、检测凋亡ELISA试剂盒购自美国Sigma公司；胎牛血清、RPMI1640、核蛋白提取试剂盒购自上海索莱宝生物科技有限公司；DNMT1、Axin、Bcl-2、cyclinD1抗体购自美国Sigma公司；反转录试剂盒、定量PCR试剂盒购自美国Thermo Fisher Scientific公司。

2.细胞培养及分组：用含10%胎牛血清的RPMI1640培养基，置37℃、5%的CO2、相对饱和湿度下培养。细胞实验分为两组，即对照组(未予药物干预)和告达庭组(30μmol/L告达庭作用SKOV3细胞24h)。

3.CCK-8法检测细胞增殖：收集处于对数生长期的SKOV3细胞，制成单细胞悬液，接种到96孔板，各孔细胞均匀，每孔细胞数约5×103，过夜贴壁后，分别加入不同浓度告达庭(7.5、15、30、60μmol/L)，每组3孔，置37℃培养箱作用24h，同时设……