张静艳 郭科东 金 明 荣 华 张晓杰

帕金森病(Parkinson′s disease，PD)是中老年人群常见的神经系统退行性疾病，以肌肉强直、静止性震颤等症状为主要临床表现，其发生率逐年上升，严重威胁人类健康[1]。PD的治疗目前以外源性补充多巴胺(dopamine，DA)为主，虽然能够改善疾病的症状，但由于缺乏神经保护作用，不能阻止神经元的变性、疾病进展及致残。因此需要进一步研究有效治疗PD的潜在新疗法[2，3]。

镇肝熄风汤记载于《医学衷中参西录》,临床用于肝肾阴亏、肝阳上亢型PD疗效显著[4]。但大复方药味复杂，不同成分叠加后的作用难以预测。牛膝与白芍是镇肝熄风汤的核心药对，是治疗帕金森病方剂中出现频率较高的单味中药，且笔者课题组前期细胞实验已经证实，牛膝与白芍有效组分配伍对PD多巴胺能神经元具有协同保护作用，但其配伍的体内研究尚未有报道[5，6]。本实验提取镇肝熄风汤的君药牛膝和臣药白芍为核心药对，以基线等比增减设计法为基础，牛膝与白芍2∶1为基线向两侧扩展，直至扩大到极点(0∶4、4∶0)，最后形成牛膝与白芍 0∶4、1∶4、1∶2、1∶1、2∶1、4∶1、4∶0配比组，探索其在体内发挥神经保护作用的最佳配伍比例[7]。

材料与方法

1.实验材料：8周龄C57BL/6雄性小鼠90只，体质量为22±2g，由维通利华(北京)实验动物科技有限公司提供，实验动物许可证号：SCXK(京)2016-0006。附子(D4120201)购自黄冈金贵中药发展有限公司，怀牛膝(801000130)、白芍(801001062)均购自北京同仁堂饮片有限公司，分别以相应比例混合。所有药材按传统煎药法制成含生药附子0.2g/ml、牛膝白芍0.5g/ml药液。MPTP(M 0896)购自美国Sigma公司，兔抗鼠TH抗体(2792S)购自美国CST公司,β-actin抗体(4967S)购自美国CST公司，羊抗兔IgG抗体(BA1054)购自武汉博士德生物工程公司。……