范洪桥 刘丽芳

瘢痕是皮肤烧伤后最常见的并发症之一，增生性瘢痕(hypertrophic scar，HS)作为临床上最常见的病理性瘢痕，烧伤后增生性瘢痕的发生率为91%[1]。近年来研究已经证实，在瘢痕形成的过程中血管生成相关因子呈现出动态表达的趋势[2]。Notch信号通路具有调节多种细胞的发育，决定多种细胞的增殖、分化以及凋亡的功能。阻断Notch信号通路可通过抑制炎性反应和胶原沉积来有效缓解瘢痕形成[3]。但在增生性瘢痕中，Notch信号通路与血管生成相关性研究报道较少，阻断Notch信号通路以抑制血管生成是否有防治增生性瘢痕的作用尚不清楚。因此，本研究拟以SD大鼠深Ⅱ°烧伤增生性瘢痕模型为研究对象，采用VG染色计算胶原纤维面密度；采用免疫组化、Western blot法检测VEGF、TGF-β1的蛋白表达；采用RT-PCR法检测Notch1、Jagged1mRNA的表达，旨在初步阐明阻断Notch信号通路以抑制血管生成达到治疗增生性瘢痕的目的。

材料与方法

1.实验动物与材料:体质量为180～220g的清洁级SD大鼠，雌雄不限，由湖南中医药大学SPF级动物实验室提供，环境许可证号：SYXK(湘)2013-0005；DAPT(GSI-IX)(美国Selleck公司)；二甲基亚砜DMSO(美国 Sigma公司)；小鼠抗VEGF单克隆抗体、山羊抗Ang-1多克隆抗体、小鼠抗TGF-β1单克隆抗体、兔抗大鼠Notch1单克隆抗体、兔抗大鼠Jagged1单克隆抗体均购自北京中杉金桥生物技术有限公司；β-actin多克隆抗体购自北京博奥森生物技术有限公司；ECL化学发光检测试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司；全蛋白抽提试剂盒购自美国Key Gene公司；DAB显色试剂盒购自北京中杉金桥生物技术有限公司；BCA蛋白浓度测定试剂盒购自北京索来宝科技有限公司。……