谢华萍，张雪舟

（1.广东祈福医院 口腔科，广东 广州 510000；2.南方科技大学医院 口腔科，广东 深圳 518000）

0 引言

牙周炎是临床常见的发生于牙周组织的慢性炎症，一般由牙菌斑中的细菌侵犯所致，主要表现为牙齿松动、牙龈红肿等[1]。牙周炎多发于35 岁以上的成人中，由于早期症状不明显而常被忽视，但等到症状严重时牙齿多被破坏吸收，无法保全，所以早诊断早治疗十分关键。寻找诊断牙周炎的特异性指标是当前临床研究的重点。研究显示，牙周组织细胞可以分泌MMPs（基质金属蛋白酶），其中MMP-8 作为MMPs 中的一类胶原酶，与牙周炎的形成与发展密切相关[2]。而CD147（细胞外基质金属蛋白酶诱导因子）可以激活邻近成纤细胞使其产生MMPs，同样与牙周炎的发展存在相关性。此外M-CSFR 作为M-CSF（巨噬细胞集落刺激因子）的受体，也参与了牙周炎的形成。但目前临床缺少关于牙周炎患者CD147、MMP-8 及M-CSFR水平变化的研究。基于此，本次选择了60 例牙周炎患者和40 例健康志愿者进行了对照研究，现总结如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

本次选取广东祈福医院2020 年1 月至2020 年10月收治的60 例牙周炎患者作为研究组，选择同一时期的40 例健康志愿者作为对照组。研究组男33 例，女27 例。年龄30～73 岁，平均（49.78±11.46）岁；对照组男性24 例，女性16 例。年龄31～74 岁，平均（49.58±11.62）岁。该研究已经过医院伦理委员会审核批准，两组的一般资料没有显著差异（P>0.05），可进行研究。

1.2 入选标准

（1）纳入标准：①牙周炎患者均符合牙周病新分类诊断标准[3]：2 颗或2 颗以上不相邻牙的邻面临床附着丧失或有2 颗及以上牙齿的颊侧或舌侧临床附着丧失≥3mm 且合并有牙周袋≥3mm。符合其中一条即可；②牙周炎患者均6 个月内未行过牙周治疗；③健康志愿者均无牙周病及病史，且3 个月内未行过牙周治疗；④纳入研究者均不抽烟，不存在严重器质性疾病，且6 个月内没有用过抗生素或免疫制剂；⑤纳入研究者均知晓研究内容且自愿签字同意。

（2）排除标准：①处于妊娠期或哺乳期女性；②存在严重器质性疾病或系统性疾病；③近期接受过牙周治疗，或使用过抗生素、免疫制剂；④非自愿参与研究或中途退出研究。

1.3 方法

（1）研究分组：选择我院收治的60 例牙周炎患者作为研究组，选择同一时期的40 例健康志愿者作为对照组。其中60 例牙周炎患者按照牙周病国际分类标准（2018 版）[4]将其分为轻中度组和重度组，每组各30 例。牙周炎分期标准：Ⅰ期：邻面最严重位点附着丧失：1～2mm，影像学骨丧失：牙根冠方1/3（<15%），最大PD（牙周探诊深度）≤4mm，以水平型骨吸收为主；Ⅱ期：邻面最严重位点附着丧失：3～4mm，影像学骨丧失：牙根冠方1/3（15%～33%），最大PD ≤5mm，以水平型骨吸收为主；Ⅲ期：邻面最严重位点附着丧失≥5mm，影像学骨丧失延伸到根中1/3 或根尖1/3，因牙周炎失牙数≤4 颗，最大PD ≥6mm，垂直型骨吸收≥3mm，根分叉病变Ⅱ～Ⅲ度，中度压槽骨破坏；Ⅳ期：邻面最严重位点附着丧失≥5mm，影像学骨丧失延伸到根中1/3 或根尖1/3，因牙周炎失牙数≥5 颗，在Ⅲ期基础上伴有咀嚼功能异常、咬合紊乱、重度压槽骨破坏的等需要综合治疗的症状。其中Ⅰ、Ⅱ期为轻中度组，Ⅲ、Ⅳ期为重度组。

（2）龈沟液采集：①选择颈部无填充体无龋损的牙齿的4 个邻面位点（包括1 颗第一磨牙和1 颗单根牙的近远中邻面位点），用无菌刮匙将牙龈上的菌斑及牙石去除，并隔湿、吹干牙面；②在牙周袋最深处放入滤纸条（2mm×8mm），保留30s 收集龈沟液；③滤纸条取出后放入装有PBS（1mL）的试管中，在室温下洗脱40min；④在4℃下，以1000r/min 的速度离心5min 后收集上清液，保存在-20℃中等待检测。

（3）检测指标：采用免疫酶联吸附试验对纳入研究者的龈沟液CD147、MMP-8 及M-CSFR 水平进行检测。CD147 试剂盒购自上海臻科生物科技有限公司，MMP-8 试剂盒购自上海润裕生物科技有限公司，M-CSFR 试剂盒购自上海双赢生物科技有限公司。检测操作均按照试剂盒说明进行。

1.4 评价指标

①比较研究组与对照组龈沟液中CD147、MMP-8及M-CSFR 水平；②比较轻中度组和重度组龈沟液中CD147、MMP-8 及M-CSFR 水平。

1.5 统计学处理

使用统计学软件SPSS 22.0 对本次研究所涉及的数据进行处理和分析，CD147 水平等计量资料以（）表示，用t进行检验，性别等计数资料以[n（%）]表示，用χ2进行检验；当数据P<0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 研究组与对照组龈沟液中CD147、MMP-8及M-CSFR水平比较

研究组龈沟液中CD147、MMP-8 及M-CSFR 水平均高于对照组，差异有统计学意义（P<0.01），如表1 所示。

表1 研究组与对照组龈沟液CD147、MMP-8及M-CSFR水平比较（）

表1 研究组与对照组龈沟液CD147、MMP-8及M-CSFR水平比较（）

2.2 轻中度组和重度组龈沟液中CD147、MMP-8及M-CSFR水平比较

重度组龈沟液中CD147、MMP-8 及M-CSFR 水平均高于轻中度组，差异有高度统计学意义（P<0.01），如表2 所示。

表2 轻度组和重度组龈沟液中CD147、MMP-8及M-CSFR水平比较（）

表2 轻度组和重度组龈沟液中CD147、MMP-8及M-CSFR水平比较（）

3 讨论

牙周炎是由牙菌斑中微生物引发的牙周支持组织炎症，牙槽骨吸收等牙周支持组织慢性感染性疾病，如不及时治疗会导致牙齿松动甚至丧失，严重影响患者的生活质量。而且牙周炎所导致的压槽骨吸收是不可逆转的，所以早诊断早治疗对于牙周炎患者十分重要。

龈沟液是通过结合上皮及龈沟内壁上皮进入龈沟的结缔组织液体，其成分与血清相似。通常情况下，龈沟内会有少许龈沟液聚积，但由于菌斑微生物及其代谢产物的存在，会有渗透梯度的变化。研究发现，龈沟液中的炎性因子聚集与牙周炎的发生及发展息息相关，当牙龈出现炎症时，龈沟和结缔组织会出现水肿，导致龈沟液增加，所以，可以通过检测龈沟液中的细胞因子评估牙周炎的病情进展[5]。牙周组织在抵抗牙菌斑微生物时会出现炎症反应，从而产生基质金属蛋白酶（MMPs）、细胞因子等炎症介质。MMPs 可以通过降解细胞外基质，破坏牙周支持组织，促进牙槽骨的吸收，加重牙周病变。研究显示，重度牙周炎患者的血清MMP-8 水平明显比正常人群高[6]。CD147又称EMMPRIN（细胞外基质金属蛋白酶诱导因子），是一种跨膜糖蛋白，可以通过激活邻近成纤细胞使其产生MMPs。免疫组化检测发现，CD147 广泛分布于炎性牙龈的上、下皮下结缔组织以及基底层细胞膜中，且分布高于正常牙龈，而且，研究证实CD147 与牙周炎、种植体周围炎等口腔疾病联系密切[7]。而M-CSFR作为M-CSF 的受体也参与了牙周炎的形成。骨吸收是牙周炎主要的病理过程，在牙周炎快速发展的过程中产生的致炎因子会使破骨细胞活化从而破坏和吸收牙槽骨，加重牙周炎程度，而M-CSF 由成骨细胞产生，靶向破骨细胞，其可以通过促进破骨细胞生成而参与牙周炎的炎症过程[8]。

本次研究发现：研究组龈沟液中CD147、MMP-8及M-CSFR 水平均高于对照组，差异有高度统计学意义（P<0.01）。这与柴琳[9]等人的研究结果相似，其研究采用酶联免疫法检测了20 例牙周炎患者和20 例健康人的龈沟液CD147 水平，发现牙周炎患者的CD147 水平高于健康人，且CD147 水平随牙周炎症状的减轻而降低。这提示牙周炎患者龈沟液的CD147、MMP-8 及M-CSFR 水平高于正常人群。同时，研究还发现：重度组龈沟液中CD147、MMP-8及M-CSFR 水平均高于轻中度组，差异有统计学意义（P<0.01）。这与孙欣彤[10]等人的研究结果相似，其研究选择了50 例慢性牙周炎患者，并按病情分为了中度组（23 例）和重度组（27 例），选择同期的25 例健康志愿者作为对照组，经过检测发现牙周炎患者龈沟液MMP-8 水平高于对照组，且龈沟液MMP-8 水平与病情程度成正比。这提示重度牙周炎患者龈沟液中CD147、MMP-8 及M-CSFR 水平高于轻中度患者。其水平与病情程度成正比。

综上所述，牙周炎患者龈沟液中CD147、MMP-8及M-CSFR 水平随牙周炎的严重程度而上升，可作为检测牙周炎严重程度的指标，为治疗提供依据。