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龈沟液中IL-1β、hs-CRP、LPS水平与牙周牙髓联合病变病情程度及治疗效果的关系

2022-05-30张雪楠曲妍王立新

分子诊断与治疗杂志 2022年4期
关键词:牙髓牙周病情

张雪楠 曲妍 王立新

牙周牙髓联合病变患病率随我国人口老龄化趋势加剧呈明显升高态势,严重影响患者生活质量[1-2]。相关研究发现,炎性反应是牙周牙髓联合病变的关键因素,机体遭受致病菌细胞中脂多糖刺激,促使白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、超敏C 反应蛋白(High sensitivity C-reactive protein,hs-CRP)等炎性因子合成释放,进而破坏牙齿支持组织,诱发一系列病理改变[3-4]。但关于龈沟液中L-1β、hs-CRP、内毒素(Lipolysaccharide,LPS)与病情及疗效关联性鲜有研究。本研究首次分析龈沟液中L-1β、hs-CRP、LPS 水平与牙周牙髓联合病变患者病情程度、治疗效果的关系。报道如下。

1 资料和方法

1.1 一般资料

选取首都医科大学附属北京康复医院2020年1月至2021年8月收治的牙周牙髓联合病变患者96例作为研究对象,均经症状、查体及X 线片检查明确诊断,且符合《牙周病学第四版》中的诊断标准[5]。排除根管变异、钙化者;排除妊娠期或哺乳期女性;排除急性牙周炎脓肿、龋齿、隐裂或装有正畸装置者;排除精神行为异常者。其中男53 例,女43 例;年龄平均(52.31±5.49)岁;体质量指数平均(22.84±2.05)kg/m2;病程平均(2.90±0.58)年;根据临床附着水平(CAL)[6]分为轻度25 例、中度41 例、重度30 例。所有患者均知情本研究,且自愿签署知情同意书,本研究经本院伦理委员会审批同意。

1.2 方法

1.2.1 治疗方法

在根管治疗1 周后行全口龈下刮治术与根面平整术。取局部麻醉,在牙周探针指导下使用手动刮治器行龈下刮治与根面平整,于24 h 内完成,上午实施单侧2 象限内刮治,下午实施对侧2 象限内刮治,刮治结束后观察根面,保证完全清除牙石,根面光滑坚硬,最后应用过氧化氢溶液(3.0%)、氯化钠溶液(0.9%)反复交替冲洗牙周袋,并将盐酸米诺环素软膏置入牙周袋内,加强口腔卫生指导。

1.2.2 检测方法

餐后120 min,采集龈沟液,具体步骤:清除龈沟液收集部位龈上牙石与菌斑,清水漱口后,棉卷隔湿,轻吹牙龈60 s,将无菌滤纸条(2 mm×8 mm)插入牙体近中、远中、颊侧、舌侧龈沟位置,遇轻微阻力时停止,停留30 s 后取出,每次测量间隔时间20 min。同一患者所有龈沟液滤纸均置入同一微离心管内,电子天平称其重量,与采集前微离心管重量相减,获取龈沟液重量(误差d=0.000 1 g)[7]。每只冻存管仅收集1 例患者龈沟液,在4℃条件下以5 000r/min 的速率离心3 min,半径3cm,取上清液,在-70℃冰箱低温保存。采用酶联免疫吸附法检测龈沟液IL-1β水平,试剂盒购自艾美捷科技有限公司,货号:583311-96;采用全自动微粒子化学发光免疫分析仪(美国雅培公司)以化学发光免疫法检测龈沟液hs-CRP 水平,试剂盒购自上海信裕生物科技有限公司;采用鲎试剂法检测龈沟液LPS 水平,试剂盒购自上海坤肯生物化工有限公司。所有检测操作步骤均根据仪器、试剂盒说明书进行,且均由同一检查者完成。

1.3 疗效判定标准[8]

疗效评估均由同一检查者完成。炎症与自觉症状基本消失,牙龈出血、红肿消失,牙周袋、牙齿咀嚼功能恢复正常为显效;炎症好转,自觉症状明显减轻,牙龈出血、红肿减轻,牙周袋变浅,牙齿咀嚼功能改善为有效;未达到显效、有效为无效。总有效率=显效率+有效率。

1.4 统计学方法

采用SPSS 22.0 软件分析处理数据,计数资料用n(%)表示,χ2检验,计量资料采用(±s)表示,两组间比较用t检验,多组间比较采用单因素方差分析,多重比较采用LSD-t 检验,通过Logistic 进行多因素回归分析,采用ROC 曲线分析预测价值,P<0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同病情程度患者龈沟液IL-1β、hs-CRP、LPS 水平

龈沟液IL-1β、hs-CRP、LPS 水平随病情程度增加呈升高趋势,重度患者>中度患者>轻度患者,差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 不同病情程度患者龈沟液IL-1β、hs-CRP、LPS 水平比较(±s)Table 1 IL-1 in gingival crevicular fluid of patients with different disease severity β、Comparison of hs CRP and LPS levels(±s)

表1 不同病情程度患者龈沟液IL-1β、hs-CRP、LPS 水平比较(±s)Table 1 IL-1 in gingival crevicular fluid of patients with different disease severity β、Comparison of hs CRP and LPS levels(±s)

组别轻度患者中度患者重度患者F 值P 值n 25 41 30 IL-1β(ng/mL)6.89±1.04 8.03±1.21 10.34±1.68 48.977<0.001 hs-CRP(ng/mL)9.26±1.45 12.13±2.03 15.07±2.81 48.397<0.001 LPS(×107 EU/L)5.15±0.87 7.36±1.32 10.59±1.72 111.666<0.001

2.2 牙周牙髓联合病变患者疗效的单因素分析

不同疗效患者病程、病情程度、治疗2 周后、治疗4 周后显效者龈沟液IL-1β、hs-CRP、LPS 水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 牙周牙髓联合病变患者疗效的单因素分析[n(%),(±s)]Table 2 single factor analysis of curative effect in patients with combined periodontal and dental pulp lesions[n(%),(±s)]

表2 牙周牙髓联合病变患者疗效的单因素分析[n(%),(±s)]Table 2 single factor analysis of curative effect in patients with combined periodontal and dental pulp lesions[n(%),(±s)]

年龄(岁)资料≥60<60 F/χ2值0.068 P 值0.966性别男女0.043 0.979体质量指数(kg/m2)0.131 0.937病程(年)13.291 0.001病情程度8.863 0.031龈沟液IL-1β(ng/mL)龈沟液hs-CRP(ng/mL)龈沟液LPS(×107 EU/L)≥24<24<3≥3轻度中度重度治疗前治疗2 周后治疗4 周后治疗前治疗2 周后治疗4 周后治疗前治疗2 周后治疗4 周后显效(n=52)44(84.62)8(15.38)29(55.77)23(44.23)27(51.92)25(48.08)40(76.92)12(23.08)17(32.69)26(50.00)9(17.31)8.31±1.72 6.46±0.79 5.27±0.55 12.17±1.63 8.14±1.57 5.91±1.06 7.78±1.18 4.45±1.09 2.76±0.82有效(n=27)23(85.19)4(14.81)15(55.56)12(44.44)14(51.85)13(48.15)12(44.44)15(55.56)6(22.22)10(37.04)11(40.74)8.52±1.65 7.28±0.93 6.36±0.70 12.33±1.81 9.92±1.80 7.65±1.37 7.72±1.35 5.97±1.53 4.06±1.31无效(n=17)14(82.35)3(17.65)9(52.94)8(47.06)8(47.06)9(52.94)6(35.29)11(64.71)2(11.76)5(29.41)10(58.82)8.81±1.50 8.08±1.12 7.21±0.87 12.64±2.02 11.79±2.14 9.44±1.85 7.94±1.41 7.13±1.22 6.28±2.09 0.604 23.167 64.059 0.466 30.494 50.396 0.161 34.045 50.742 0.549<0.001<0.001 0.629<0.001<0.001 0.852<0.001<0.001

2.3 牙周牙髓联合病变患者疗效的多因素分析

以牙周牙髓联合病变患者疗效作为自变量,单因素纳入Logistic 回归模型,结果显示,病程>3年、病情程度为重度、治疗2、4 周后龈沟液IL-1β、hs-CRP、LPS 水平是牙周牙髓联合病变患者疗效的独立危险因素(P<0.05)。见表3。

表3 牙周牙髓联合病变患者疗效的多因素分析Table 3 multivariate analysis of curative effect in patients with combined periodontal and pulp lesions

2.4 龈沟液IL-1β、hs-CRP、LPS 对疗效的预测价值

ROC 曲线分析,龈沟液IL-1β、hs-CRP、LPS 联合治疗2 周后AUC 值为0.882,治疗4 周AUC 为0.933,优于单一指标治疗(P<0.05)。见表4、图1。

图1 龈沟液IL-1β、hs-CRP、LPS 对疗效的预测价值Figure 1 gingival crevicular fluid IL-1 β、Predictive value of hs CRP and LPS in curative effect

表4 ROC 分析结果Table 4 ROC analysis results

3 讨论

IL-1β 可刺激造血细胞、T、B 细胞增殖、分化,抑制金属蛋白酶活性,激活宿主细胞对细菌感染的免疫反应。本研究结果显示,重度牙周牙髓联合病变患者龈沟液中IL-1β 水平高于中度患者、轻度患者,且通过比较可知治疗4 周后显效者龈沟液IL-1β 水平明显低于有效者、无效者,这可能归因于IL-β 水平升高,可诱导成纤维细胞胶原酶、IL-6释放,增加白细胞、巨噬细胞含量,进而参与细胞外基质分解、代谢、牙周免疫破坏过程;而牙周常规治疗有助于抑制局部牙龈表面牙菌斑沉积,控制局部炎症发展,改善牙周、牙髓碱性微环境,从而促进牙体修复[9]。进一步绘制ROC 曲线分析可知,龈沟液中IL-1β 预测治疗4 周后疗效敏感度高达91.14%,说明龈沟液IL-1β 可作为评估牙周牙髓联合病变患者疗效的敏感性指标。

hs-CRP 是一种反映全身炎性反应的敏感因子,研究认为,其水平变化可有效反映牙周组织损伤情况[10]。本研究发现,龈沟液中hs-CRP 水平随病情程度加重呈上升趋势,与蔡洁明等[11]报道相似,这可能是由于龈沟液hs-CRP 水平表达上调,可促使局部中性粒细胞酶释放,进而破坏牙体骨质成分,诱导牙周、牙龈组织细胞凋亡,改变牙周微生物环境,从而加重牙周、牙髓组织损伤。进一步经ROC 曲线发现,当最佳截断值为7.70 ng/mL时,治疗4 周后龈沟液hs-CRP AUC 最大,为0.793,与薛媛等[12]观点一致,有力佐证了龈沟液hs-CRP有望成为牙周牙髓联合病变治疗的新靶点。

Raheja J 等[13]认为LPS 是牙周炎引发牙周牙髓联合病变的重要因素之一。同时报道还显示,LPS含量在牙周、牙髓病变患者牙髓组织中呈异常高表达状态,支持本研究观点[14-16]。说明龈沟液LPS 参与牙周牙髓联合病变的发生、发展。考虑机制在于LPS 水平上调,不仅可直接作用于牙髓组织,诱导血小板向血管内皮细胞黏附、聚集,从而增加弥漫性血管内凝血发生率,还能抑制细胞增殖,刺激牙髓、牙本质,继而影响牙髓细胞损伤修复。本研究结果显示,治疗4 周后龈沟液IL-1β、hs-CRP、LPS 联合预测AUC 均高于上述指标单一预测,且预测特异度高达94.12%,可见临床通过动态监测龈沟液IL-1β、hs-CRP、LPS 水平,有助于评估牙周牙髓联合病变疗效。

综上可知,龈沟液IL-1β、hs-CRP、LPS 水平随牙周牙髓联合病变病情加重而升高,是影响牙周牙髓联合病变疗效的独立危险因素,三者联合检测在疗效评估中具有较高预测价值,有望成为治疗牙周牙髓联合病变的新的参考指标。

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