肖永琴，张 珂，曹静平

（1.四川省肿瘤医院，四川 成都 610041；2.重庆医科大学附属儿童医院，重庆 400000）

目前，胃癌是常见的恶性消化道肿瘤之一，因早期诊断率较低，且总体上预后较差，所以胃癌的发病率高、死亡率高[1]。已有研究表明，中医药能够通过调节多个信号通路诱导胃癌细胞的凋亡[2-3]。因此研究中医药治疗胃癌具有重要意义。

虎杖苷（polydatin，PD）是从虎杖的干燥根茎中提取的单体成分，也可在多种植物中被提取。药理研究表明，虎杖苷具有抗炎[4]、抗过敏[5]、抗肿瘤[6]的功效。虎杖苷的抗肿瘤作用已在多种肿瘤中证实，例如鼻咽癌[7]、肺癌[8]、乳腺癌[9]等。本研究以人胃癌SGC-7901为研究对象，探究虎杖苷通过调节miR-301a表达进而促进胃癌SGC-7901细胞凋亡的作用机制，为后续进一步研究抗肿瘤药物靶点提供基础。

1 实验材料

1.1 细胞 人胃癌细胞株SGC-7901（CL-0206）、人正常胃上皮细胞GES-1（CL-0563）购于武汉普诺赛生命科技有限公司，用含有10%胎牛血清、1%青链霉素的RPMI-1640培养基在37℃、5%CO2的细胞培养箱对细胞进行培养。

1.2 药物与试剂 虎杖苷（polydatin，批号：HY-N0120A，纯度为98.95%，美国Med Chem Express公司）；细胞培养基RPMI-1640（货号：PM150110，上海雅吉生物科技有限公司）；青链霉素（货号：30-004-ci，corning公司）；胎牛血清（货号：abs972，上海优宁维生物科技有限公司）；胰蛋白酶（货号：T4049，Sigma公司）；逆转录试剂盒（货号：RR037A）、荧光定量PCR检测试剂盒（货号：DRR096A）（大连宝生物工程有限公司）；Lipo6000 TM转染试剂（货号：C0526）、Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒（货号：C1062M）、CCK8试剂盒（货号：C0038）（碧云天生物科技有限公司）；GAPDH（货号：AF5009，小鼠单抗，碧云天生物科技有限公司）；Survivin抗体（货号：ab469，兔多抗）、Bcl-2抗体（货号：ab59348，兔多抗）、Bax抗体（货号：ab182733，兔单抗）、山羊抗兔IgG H&L（HRP）（货号：ab205718）、山羊抗小鼠IgG H&L（HRP）（货号：ab6789）（abcam公司）；……