赵夕琛，靳育静，孙晓薇，李代清，朱铁虹

（1.天津医科大学总医院内分泌与代谢科,天津300052；2.天津医科大学朱宪彝纪念医院代谢病科,天津300134）

人胰岛淀粉样多肽（hIAPP）是胰岛β细胞分泌的淀粉样物质，也称为人胰淀素[1-3]。已有研究表明，hIAPP聚集过程的中间产物对胰岛细胞具有毒性作用，且为2型糖尿病患者胰岛细胞功能异常及凋亡的主要原因之一[4-7]，而临床上尚缺乏能有效抑制hIAPP聚集的药物。最近研究表明，利拉鲁肽可以减少阿尔兹海默病模型鼠脑内的Aβ淀粉样蛋白沉积与相关炎症反应，改善鼠的记忆功能[8-9]。Aβ与hIAPP具有相似的二级折叠结构与致病机制。因此本研究主要探讨利拉鲁肽是否可以通过抑制hIAPP聚集并减少hIAPP相关的胰岛细胞损伤。

1 材料与方法

1.1 实验动物 250～300 g雄性Wistar大鼠购自中国人民解放军医学科学院卫生学环境医学研究所动物实验中心，动物级别为SpF级。

1.2 主要试剂 胶原酶（Ⅴ型）、hIAPP购自Sigma公司；Annexin-V/PI荧光染色试剂盒购自万类生物有限公司；利拉鲁肽注射液由诺和诺德公司提供。

1.3 实验方法

1.3.1 硫磺素T实验 新鲜配置硫磺素T、hIAPP的母液，分别为1 mmol/L与100μmol/L。在黑色96孔酶标板中，每孔中加入相应体积的母液和PBS缓冲液构建100μL反应体系：硫磺素T终浓度为10μmol/L，hIAPP终浓度为5μmol/L，单独或联合相应浓度利拉鲁肽（500 nmol/L和5μmol/L）共同孵育。酶标板中的体系液按照上述比例配置完毕后，置于全波长扫描多功能读数仪上，37℃孵育。每5 min摇10 s，静置10 s后读数，记录在440 nm激发波长和485 nm发射波长下的荧光强度。每组设立4个复孔，本底孔为未加药物仅含硫磺素T的检测液，各组最终荧光强度为实测荧光数值与本底孔荧光数值的差值。……