王克朕，兰春根，谷峰，马勇杰

（天津医科大学肿瘤医院1.肿瘤细胞生物学实验室；2.乳腺病理科，国家肿瘤临床医学研究中心，天津市“肿瘤防治”重点实验室，天津市恶性肿瘤临床医学研究中心，天津300060）

胶质瘤是成年人中最常见，同时致死率最高的脑部肿瘤[1-2]。尽管现阶段对胶质瘤的认识日渐加深，包括手术切除、放疗和化疗在内的治疗手段已取得长足进步，但由于胶质瘤的高侵袭性，治疗效果仍不令人满意[3-6]。进一步探索胶质瘤恶性进展过程中的关键分子对于实现胶质瘤患者的精准治疗具有重要价值。多聚嘧啶区结合蛋白1（PTBP1）是核不均一性核糖核蛋白（hnRNP）家族的成员，参与调控多种分子的转录后修饰[7-8]。研究表明，PTBP1在正常神经发育过程中表达受到抑制，而在多种脑肿瘤中高表达[9-10]，但是其在胶质瘤恶性进展中发挥的功能尚不明确。本研究利用多个数据库分析PTBP1在胶质瘤和癌旁组织中的表达水平及其与胶质瘤的组织学级别和患者预后的关系；并通过慢病毒感染筛选出稳定敲低PTBP1的LN229细胞株，进而探究PTBP1蛋白对胶质瘤细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响。

1 材料与方法

1.1 细胞系和主要试剂 人胶质瘤细胞系LN229和人胚胎肾细胞系HEK-293T（American Type Culture Collection），胎牛血清（GIBCO公司），DMEM细胞培养基（GIBCO公司），Transwell小室（Corning公司），Matrigel基质胶（Corning公司），聚凝胺（polybrene，Sigma公司），遗传霉素（G418，Solarbio公司），EdU细胞增殖试剂盒（碧云天生物技术有限公司），PCR引物（生工生物工程股份有限公司），胶回收试剂盒（TaKaRa公司），限制性内切酶BamH1-HF和EcoR1-HF（NEB公司），质粒小提试剂盒（天……