唐双阳 丁 霜 申海艳 伍虹蓉 胡 煜 廖雅琪 熊雨棱 李 乐

1（南华大学病原生物学研究所 特殊病原体防控湖南省重点实验室 衡阳 421001）

2（南华大学公共卫生学院 衡阳 421001）

3（南华大学衡阳医学院 衡阳 421001）

电离辐射能通过多种信号转导通路引发细胞损伤，促进细胞凋亡［1］。有研究报道，凋亡是放射线导致肿瘤细胞死亡的主要方式之一［2］，肿瘤细胞对辐射的敏感性主要取决于辐射后细胞内的DNA损伤修复水平和辐射引发的信号转导机制，从而导致凋亡相关基因表达、细胞凋亡及细胞周期进程的改变。

人死亡结构域相关蛋白（hDaxx）是一种高度保守的多功能蛋白，能使受损DNA无法修复而使细胞发生凋亡［3-4］，从而可能促进放射治疗后肿瘤细胞的凋亡。细胞凋亡是由Caspase-8诱导的一种“细胞自杀程序”，Caspase-8不会引起组织损伤，是死亡受体介导的凋亡途径的关键启动子。Daxx在影响细胞凋亡的作用机制方面尚未完全明确。Daxx作为HIF-1a/HDAC1/Slug轴介导癌细胞浸润的抑制子，有可能成为抑制癌症转移的一个潜在的治疗靶点［5］。

课题组前期研究表明，Daxx高表达可下调宫颈癌HeLa细胞中HPV16E6蛋白对Caspase-8的抑制作用，从而促进凋亡［6］。本研究选用HeLa细胞为研究对象，通过研究过表达Daxx对经γ射线照射细胞的凋亡的影响，探讨Daxx与辐射诱导细胞凋亡之间的关系及其机制，为开辟宫颈癌放射治疗新途径提供理论基础。

1 材料与方法

1.1 主要试剂

真核表达载体pcDNA3.1（+）/Daxx以及pcDNA3.1（+）-C1空载体由南华大学病原生物学研究所提供；改良eagle培养基（DMEM）购自Gibco公司（USA）；MTT，LipofectamineTM2000购于Invitrogen公司（USA）；……