李志强，王书利，李欣欣，张倪晨，席丽，崔艳艳

(商丘师范学院 生物与食品学院，河南 商丘 476000)

布鲁氏菌(Brucella)为革兰氏阴性菌，是人和动物机体细胞内的兼性病原体，能够在专业和非专业的吞噬细胞内繁殖[1]，引起人和多种动物发生疾病，给人类带来巨大经济损失[2].布鲁氏菌可在动物体内引起急性传染病和妊娠动物的流产[3].人布鲁氏菌病的症状是发烧、关节炎、感染性心内膜炎、脾脓肿、败血症和脊椎炎[4,5].在宿主体内，为了促进细菌繁殖，布鲁氏菌必须适应恶劣的胞内环境胁迫，或影响某些信号途径和蛋白的表达.已经证实布鲁氏菌中存在多种应激相关蛋白和毒力相关蛋白，但其潜在致病机制尚不清楚.

已有研究表明pgk基因编码磷酸甘油酸激酶.PGK将磷酸基从1,3-二磷酸甘油酯转移到ADP，形成ATP和3-磷酸甘油酯，是糖酵解和糖异生生成ATP的重要步骤[6].因此，PGK是布鲁氏菌非常重要的激酶.已有研究表明，布鲁氏菌pgk突变体在骨髓源巨噬细胞和小鼠体内的毒力是减弱的[7].所以，PGK与布鲁氏菌的毒力有关.本研究评价了2308Δpgk突变株在环境压力下的生存能力，以及对巨噬细胞的毒性作用，目的是进一步揭示布鲁氏菌中PGK的作用.

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 菌株、培养基和细胞系

布鲁氏菌S2308亲本株和2308Δpgk突变株为本研究室保存；布鲁氏菌液体培养基(TSB)和布鲁氏菌固体培养基(TSA)购自美国BD公司；琼脂粉购自日本Biosharp公司；氯化钠购自上海生工生物工程股份有限公司；CytoTox 96非放射性细胞毒性检测试剂盒购自美国Promega公司；……