李亚萍，翟 嵩，王 媛，邓 江，吴凤萍，王沐淇，贾晓黎，李 梅，党双锁

有证据表明，脂肪酸是诱导非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease，NAFLD)发生的重要因素[1-3]。过氧化物酶体增殖激活受体共激活因子1α(peroxisome proliferator-activated receptor coactivator 1α, PGC1α)参与了线粒体生物合成和线粒体氧化应激。在能量需求的情况下，这种核蛋白辅助转录因子调控了电子传递链、脂肪酸氧化、三羧酸循环和活性氧(reactive oxygen species, ROS)清除等一系列蛋白的表达过程。PGC1α也通过抑制核因子 κB(nuclear factor κB，NF-κB)参与了炎症反应的调控[4]。NAFLD患者肝脏PGC1α表达下降了40%，同时伴有线粒体功能异常、脂肪堆积和胰岛素抵抗[5，6]。小鼠肝组织脂肪含量与肝组织PGC1α表达呈正相关。在特异性敲除PGC1α小鼠，肝脏脂肪酸氧化显著降低，但却增加了胰岛素抵抗。PGC1α被认为是糖尿病和肥胖症重要的治疗靶点[7]。咖啡酸苯乙基酯(caffeic acid phenethyl ester，CAPE)是来源于蜜蜂蜂巢的一种酚类化合物，在肿瘤、炎症反应、氧化应激和免疫调节等方面都具有重要的保护作用[8]。CAPE能够改善胰岛素抵抗和脂肪肝形成，从而能够促进减重[9，10]。本研究采用棕榈酸酯处理L02肝细胞系建立脂肪堆积肝细胞模型，主要目的是探讨CAPE是否通过调控PGC1α表达发挥其抑制NAFLD形成的作用。通过研究发现，上调PGC1α信号通路，CAPE对棕榈酸酯诱导的肝脏L02细胞脂毒性具有有效的保护作用。

1 材料与方法

1.1 细胞与试剂 L02人正常肝细胞购自美国ATCC细胞公司； CAPE(Sigma公司)；棕榈酸酯(Sigma公司)；RNA提取试剂盒、反转录试剂盒、 2× Maxima SYBR Green/ROX qPCR Master Mix(南京诺唯赞生物科技有限公司)；过氧化物歧化酶2(superoxide dismutase2, SOD2)、PGC1α和β-actin 的Real-time PCR 引物由北京擎科生物科技有限公司合成；检测肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)和白介素6(interleukin-6，IL-6)的ELISA试剂盒( R&D公司)；……