何少微 赵怡

摘 要：真菌毒素严重威胁粮食的质量安全，对人体健康危害极大，开展基于漫反射红外光谱法的粮食真菌毒素检验方法研究。采集光谱数据，得到原始光谱图。通过数据处理与校正，去除影响样本光谱的异常信息。实验结果表明，能够清楚地反映样品的光谱特征，检测精度符合粮食要求，本文方法具有可靠性。

关键词：漫反射红外光谱法;真菌毒素;检测方法;多元散射校正

1 材料与方法

1.1 样品来源

本文收集了全国各地的粮食稻谷样品50份，样品来源范围广，具有较好的代表性，选择混合均匀的稻谷样品，每份不低于200 g，经过脱壳除杂处理，粉碎过筛，现磨现用。

1.2 仪器与试剂

实验设备选用瑞典仪器公司的近红外光谱仪，光谱测量范围300～1 600 nm，THU35C 型砻谷机、FA2104A型电子天平（精度为0.01 g）。实验的试剂主要包括黄曲菌素B1酶试剂盒、葡萄糖、无水乙醇、氢氧化钾和异丙醇等。

1.3 实验方法

1.3.1 实验原理

漫反射形式是红外光谱采集的另一种形式，主要用作固体粉末样品的采集[1-2]。红外光谱反射的漫反射光通过抗真菌毒素抗体与酵素抗原和待测抗原的竞争反应，利用酵素的催化显色反应检测真菌毒素。

1.3.2 操作步骤

使用砻谷机将样本脱壳粉碎，称取8.0 g样品放入容量为60 mL的试剂瓶中，加入10 mL甲丙醇后振荡20 min，再进行过滤后收集，制得样品提取液，待测样品溶液通过样品稀释液制得。将样本孔设置为3类，一个调零孔，24个对照孔，其余为样本孔，按照顺序依次编号。在1号孔加入样品稀释液，对照孔加入标准溶液，样品孔加入待测样液，再向1号加入酵标抗原稀释液，其余孔加入酵标抗原溶液。……