罗玉婷，杨正艳，李 蒙，赵曼竹，温秀杰，周 智

1重庆医科大学附属口腔医院，重庆 401147；2口腔疾病与生物医学重庆市重点实验室，重庆 401147；3重庆市高校市级口腔生物医学工程重点实验室，重庆 401147；4四川省泸州市西南医科大学附属口腔医院正畸科，四川泸州646000

外胚间充质干细胞(EMSCs)来源于颅神经嵴，是牙齿发育的始祖细胞［1-3］。向平滑肌和成骨细胞分化的特点限制了它在牙发育中的应用［4,5］。为了促使EMSCs发挥最大效能，本课题组利用颅神经嵴细胞中高表达的p75神经营养因子受体（p75NTR）对EMSCs进行分选纯化［6］，成功获得p75NTR阳性EMSCs［7］，并发现其正向调控了EMSCs在牙发育过程中的矿化［8］。p75NTR是神经生长因子(NGF)的低亲和力受体，属Ⅰ型跨膜肿瘤坏死受体超家族成员［9］。前期研究发现p75NTR可能参与牙发育初期上皮与间充质相互作用的调控［10］。它与小鼠牙齿硬组织形成的的昼夜节律有关，其缺失会降低牙槽骨的骨量［11］。此外，它还协同参与多条信号通路调控EMSCs成骨分化［11,12］。

p75NTR可能通过改变Dlx和Msx的转录活性从而进一步调控牙齿的发育，但中间信使是什么尚不清楚。查阅文献发现黑色素瘤相关抗原Mage-D1可能是p75NTR参与调控的下游因子［13］。Mage-D1属黑色素抗原蛋白家族Ⅱ型蛋白，介导了多种细胞生理功能，它与p75NTR的胞内域结合发挥调控作用［14］，还能调控Dlx/Msx 转录活性［15］。前期实验发现：Mage-D1 与p75NTR的组织学表达模式相近，免疫共沉淀结果也显示随着矿化天数增加，二者结合呈增多趋势，矿化相关基因表达增高［16］。基于以上，我们提出p75NTR-Mage-D1-Dlx/Msx信号通路假说。本研究通过高灵敏度的邻位连接法确证Mage-D1与活化后的p75NTR在EMSCs中的结合，使结合部位在细胞中可视化，并进一步研究二者结合对EMSCs矿化的调控作用，以期为颌骨及牙齿发育提供新依据。……