载CXCL12抗体靶向超声微泡制备及其体外卵巢癌细胞粘附性实验①
2021-11-10付丽君曾倩倩
付丽君,向 红,曾倩倩,胡 蓉
(新疆医科大学第一附属医院妇产超声科,乌鲁木齐830054)
通常患者被诊断为卵巢癌时,肿瘤已经发展到中晚期,且肿瘤病灶已经发生转移,从而导致患者失去早期治疗时机,预后差[1-2]。卵巢癌的早期诊断能够提高患者的生存率[3-4]。在临床上,超声造影技术应用较为广泛,近年来,该技术有了飞速的发展[5],而靶向超声微泡可在微泡表面上携带靶分子抗体,借助抗原抗体的特异性结合,在靶器官或靶组织区停留,实现特异性增强显影[6-7]。研究表明,基质细胞延伸因子1(CXCL12)能够与其趋化因子受体CXCR4组合,从而形成信号轴CXCL12/CXCR4,该信号轴可以对卵巢癌细胞进行调控[8-9]。本研究以CXCL12作为研究靶点,通过采用生物素-亲和素连接法将CXCL12抗体与普通微泡结合制备携CXCL12抗体的靶向超声微泡,通过一般物理特性检测和细胞爬片实验,评价靶向微泡与靶组织的体外结合能力,旨在为肿瘤的早期诊疗研究提供实验数据。
1 材料和方法
1.1 主要材料人卵巢癌细胞株SKOV3(购自武汉普诺赛生命科技有限公司),高糖培养基(Hyclone公司);磷酸盐缓冲液;胎牛血清(Hyclone,USA);Anti-CXCL12(博奥森生物科技有限公司);链酶亲和素(Streptavidin,SA,Sigma,USA);罗丹明标记山羊抗兔IgG(北京中衫金桥);凝胶制备试剂盒(Solarbio公司)。
1.2 培养人卵巢癌细胞株SKOV3细胞
1.2.1 细胞复苏 将SKOV3细胞放到提前加热好的水浴锅中,使得冻存的细胞快速溶解开。待冻存管中的细胞基本上融化后,于离心机中离心5 min。弃去离心过的细胞上清液,剩下冻存管中的下层细胞小心放到超净台上,防止细胞污染,最后加入培养基,用取样枪进行吹打混匀后,培养并观察。……
