王桂芳 龙红梅 龚喜乐缘 胡淑芳 龚灿

干眼是由于泪液的量或质以及流体动力学异常引起的泪膜不稳定和(或)眼表损害，从而导致眼部产生不适症状及视功能障碍的一类疾病[1]。脂肪间充质干细胞通过旁分泌方式释放多种生物活性因子，发挥抗炎及损伤修复的作用[2-3]。外泌体是脂肪间充质干细胞旁分泌发挥作用的一种重要介质。脂肪间充质干细胞来源的外泌体(ADSC-Exos)具有与脂肪间充质干细胞类似的抗炎和损伤修复作用。目前，ADSC-Exos已被应用于视网膜激光损伤[4]、青光眼[5]、角膜炎[6]等眼部疾病的治疗。然而，当前有关ADSC-Exos在干眼中的作用及机制研究较少。本研究以苯扎氯胺诱导的干眼小鼠为研究对象，观察ADSC-Exos对小鼠干眼的疗效，并进一步探讨ADSC-Exos治疗干眼的作用机制。

1 材料与方法

1.1 实验材料和仪器小鼠脂肪间充质干细胞和干细胞完全培养基(广州赛业生物科技有限公司)，雄性C57BL/6J小鼠(广东省医学实验动物中心)，1 g·L-1普拉洛芬滴眼液(日本参天制药株式会社)，BioLegend LEGENDplexTM多因子检测试剂盒(BioLegend公司)，苯扎氯铵(美国Sigma公司)，荧光素钠注射液(广州白云山明兴制药有限公司)，酚红棉线(日本Yokota公司)，CD9、CD63、CD81、Myd88、Toll样受体4(TLR4)和 GAPDH抗体(美国Abcam公司)；超速离心机(德国Beckman公司)，马尔文纳米粒跟踪分析仪(英国Nanosight NS300公司)，单颗粒冷冻透射电镜(美国Talos Arctic G2公司)，流式细胞仪(美国BD Accuri C6公司)。

1.2 方法

1.2.1 小鼠脂肪间充质干细胞培养用干细胞完全培养基培养细胞，将小鼠脂肪间充质干细胞置于37 ℃、体积分数5%CO2培养箱中，当细胞融合度达到80%～90%时，进行传代培养。……