唐平 陈春妹 陈执 李蒙恩 黄雄高 何泽银 李雨航 刘梅林

糖尿病视网膜病变(DR)常见于糖尿病进展的 5～10年[1]，其伴随的视神经损伤常发生于视网膜病变的早期[2]，患者常见症状为视物模糊，视力下降甚至失明；临床上治疗方法主要包括保护微血管治疗，抗炎治疗，降脂治疗，中医治疗。目前循证医学发现具有“活血通络”中医辨证理论的药物主要包括三七，水蛭，丹参，鸡血藤。人参是传统中药最具代表性的药物，具有“大补元气”“益肾助阳”的作用。既往研究证实人参皂苷Rg1能够调节DR诱导的视神经损伤[3-4]，但具体机制尚不清楚。本研究拟通过生物信息学技术探究人参皂苷Rg1治疗高糖诱导的大鼠视神经细胞损伤的潜在靶点及作用机制。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物清洁级雄性Wistar大鼠16只，体重200～250 g,2周龄，所有实验动物确保无引起眼部缺血性病变的疾病，按照国际及本院的动物伦理法则进行实验。

1.1.2 主要试剂与仪器DMEM/F12培养基(美国Gibco公司),新生胎牛血清(美国Clark公司)，CCK-8细胞增殖检测试剂盒(美国Sigma公司)，胰蛋白酶消化液、青链霉素双抗、BCA蛋白定量检测试剂盒、上样缓冲液5×(北京碧云天公司)，人参皂苷Rg1纯化物(北京源叶生物公司)，细胞培养箱(德国Binder公司)，Eclipse倒置显微镜(日本尼康公司)，伯乐电泳转印系统及伯乐ECL成像系统(美国伯乐公司)。

1.2 方法

1.2.1 生物信息学分析通过PubMed compound数据库(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pccompound/)检索人参皂苷Rg1分子结构式，使用SwissTarget数据库(http://old.swisstargetprediction.ch)将获得的分子结构式进行疾病靶点的预测，使用PubMed 数据库(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/gds/)检索高糖损伤视神经相关数据，设置健康人员为对照组，视神经损伤患者为损伤组，采用GEO 2R在线分析工具获取差异基因的表达并与SwissTarget数据库获得的预测基因进行集合。……