邵敬芝 杜珊珊 张莉蓉 张凤妍

视网膜变性疾病是一类致盲性眼病，具有家族遗传特性，进展缓慢且不可逆[1]。近年来越来越多的实验研究显示,免疫系统介导的神经炎症反应在视网膜变性疾病中发挥重要作用[2-3]。小胶质细胞是神经系统的固有免疫细胞，对神经系统发育、免疫微环境的调节具有重要作用[4-6]。在视网膜变性过程中，小胶质细胞发挥了双刃剑的作用。一方面，活化的小胶质细胞能够吞噬细胞碎片等代谢性毒素物质发挥细胞免疫作用；另一方面，持续活化的小胶质细胞释放大量的促炎因子，引发炎症损伤反应，进而损害周围的神经细胞，加速视网膜变性进程。因此，调节小胶质细胞的免疫活性是视网膜变性疾病的重要治疗策略之一。

乳脂肪球表皮生长因子8(MFG-E8)是乳汁脂肪小球表面具有免疫源性的亲脂性糖蛋白[7]。研究发现，在炎症反应、自身免疫性疾病、老年性疾病和肿瘤中，MFG-E8发挥多种功能[8-10]。MFG-E8抑制Aβ42诱导的原代小鼠大脑小胶质细胞的炎症反应[9,11]，外源性MFG-E8减少促炎细胞因子的释放进而保护外伤性脑损伤引起的神经元功能损害[12]。炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素(IL)在小胶质细胞中的表达随着MFG-E8的增加或减少而增加或减少[13]。本研究通过体外培养小胶质细胞来探讨MFG-E8对脂多糖(LPS)诱导的小胶质细胞炎症反应的作用及其机制。

1 材料与方法

1.1 主要试剂DMEM培养基、PDTC、LY294002(美国Sigma公司)；胎牛血清(FBS)(美国Genial公司)；LPS、2.5 g·L-1胰蛋白酶、RIPA裂解液、细胞计数试剂盒-8、兔抗小鼠GAPDH抗体、辣根过氧化物酶标记山羊抗兔二抗(碧云天生物技术有限公司)；……