马俊 严仁纯 吴礼锋 王传喜 黄静江 李姚 左娜 吴成 张程林

miRNA为长度在18～24个核苷酸的保守短链非编码RNA，其在各种肿瘤中均具调节作用[1]，其中包括miR-370-3p。有研究报道，miR-370-3p在喉癌发挥抑癌基因的作用，但其调控机制尚未十分清楚。信号转导和转录激活因子3（STAT3）是许多致癌信号传导途径的会聚点，在肿瘤细胞和肿瘤微环境中的免疫细胞中组成型激活[2，3]。活化的STAT3抑制针对肿瘤细胞的免疫激活所必需的介质的表达，STAT3活性促进免疫抑制因子的产生，所述免疫抑制因子在不同的免疫细胞亚群中激活STAT3，改变基因表达程序，从而抑制抗肿瘤免疫应答[4-6]。在肾母细胞瘤中STAT3可通过转录调控miR-370表达而下调WTX发挥抑制肾母细胞瘤生长的作用[7]。但miR-370-3p与STAT3在喉癌中的作用关系尚未清晰。本课题研究拟以喉癌细胞Hep-2为研究对象，检测喉癌组织和癌旁正常组织中miR-370-3p和STAT3的表达，观察过表达miR-370-3p、敲减STAT3和过表达STAT3对Hep-2细胞放射敏感性的影响，揭示其机制可能与miR-370-3p靶向STAT3有关，这将为增强喉癌放射治疗的效果提供依据。

材料与方法

1 材料

本研究的组织标本来源于皖南医学院第一附属医院弋矶山医院耳鼻咽喉头颈外科自2017年3月～2018年6月期间收治并手术治疗的喉癌患者，术中切除喉癌及癌旁组织标本共39件。本研究上报医院医学伦理委员会并批准，所有喉癌患者及家属均签署知情同意书。喉癌细胞Hep-2购于ATCC；LipofectamineTM2000、逆转录试剂盒和BCA蛋白定量试剂盒均购于大连Takara公司；MTT、DMEM培养基、胰蛋白酶和胎牛血清都购于美国GIBCO公司；……