张世仑，王大威，尹榆钧，靖 波，王秀军

(1. 海洋石油高效开发国家重点实验室，北京 100028；2.中海油研究总院有限责任公司，北京 100028；3. 南开大学 生命科学学院 分子微生物学与技术教育部重点实验室，天津 300071)

目前，从油田中分离出来的硫酸盐还原古菌只有属于广古菌门的极端嗜热菌——古球菌(Archaeoglobus)，它能以硫酸盐和硫代硫酸盐为电子受体而利用脂肪酸(C4～C8)[16-17]。尽管古菌在地下生物圈的占比很小[18]，但其所具备的硫酸盐还原功能可追溯至生命起源的早期，亦不可忽视。

本研究通过高通量测序技术，对渤海S油田油藏内源古菌的群落组成和多样性进行分析，构建硫酸盐还原功能基因的分子进化树，并且比较油田H2S治理井与非治理井之间古菌群落组成的差异，以期证实古菌对油藏环境的酸蚀作用，进而有助于工业系统因地制宜地选择适当的SRPs生物抑制策略。

1 材料与方法

1.1 材料与设备

SpectroBlue型电感耦合等离子发射光谱仪，德国Spectro公司；ICS-1100型离子色谱仪，Thermo Fisher公司；AxyPrepTM细菌基因组DNA试剂盒，Axygen Biosciences公司；EmeraldAmp©PCR反应混合物，TaKaRa公司；ABI GeneAmp©9700型热循环仪，Applied Biosystems公司；IlluminaMiseq测序平台，上海美吉生物医药科技有限公司。

1.2 方法

1.2.1 油田采出液取样

取1只容量为25 L的塑料桶，用医用酒精洗2～3次；根据井口压力选择性接上高(低)压取样器，打开取样阀，让采出液流出5～10 min并冲洗塑料桶2～3次；将采出液灌满塑料桶，每口井25 L(其中原油至少1 L，地层水至少10 L)，拧紧盖子密闭常温保存(注意：冬季防冻结、夏季防暴晒)；样品采集后尽快运送至实验室进行预处理。

1.2.2 样品离子参数检测