王晶晶 池亚菲 乔 欣 卢 静

(首都医科大学，北京 100069)

条件性基因敲除技术常用于具有胚胎致死性或具有特定的组织细胞生理学与病理生理学功能的目的基因研究，且基因靶向或转基因小鼠中条件和组织特异性重组系统的出现允许以时间调控和细胞特异性方式评估单个基因的功能。诱导型条件性基因打靶系统的建立，使得对基因在时间和空间上的靶位修饰更加明确，且效果也更加精确可靠。该技术已发展为生物医学领域一个全新且强有力的研究手段。

心肌细胞特异性表达ERT2Cre(Myh6-ERT2Cre)小鼠是Jackson Laboratory构建的心肌细胞特异性表达他莫昔芬(tamoxifen)诱导的Cre重组酶的转基因小鼠，代表了在发育中和成年心脏内,任何loxP靶向基因的时间调控失活或在心脏中特异性指导loxP失活的心脏转基因重组和表达的工具鼠[1]。表达Myh6-ERT2Cre的小鼠心肌细胞在未给予他莫昔芬处理时，并不发挥Cre重组酶的活性，而给予他莫昔芬后，Cre重组酶发生构象改变，并入核与loxP位点特异性结合而发挥基因重组的功能。Hall等[2]研究报道，使用他莫昔芬会造成小鼠短暂性的心脏功能损伤，所以合适且有效的他莫昔芬使用剂量有待探究。

为了得到诱导型心肌细胞特异性Ppara敲除小鼠，同时规避使用他莫昔芬造成心脏功能损伤而影响实验结果，本研究通过给予Pparafl/fl, Myh6-ERT2Cre小鼠不同剂量的他莫昔芬，验证Ppara基因敲除效率及对心脏功能影响，从而成功构建诱导型心肌细胞特异性Ppara基因敲除小鼠。

1 材料和方法

1.1 材……

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