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微柱凝胶试验免疫检测技术在输血科交叉配血中的应用价值

2021-11-03张红军张楠陶松涛

河南医学研究 2021年30期
关键词:悬液血型试管

张红军,张楠,陶松涛

(平煤神马医疗集团总医院 输血科,河南 平顶山 467000)

输血治疗是一种重要的医疗手段,常用于低血容量休克、手术、贫血患者,可迅速补充人体血容量,避免休克,维持人体血氧正常供应,从而挽救患者生命,改善健康状态,目前已广泛应用于多种疾病诊疗过程[1]。但输血前需实施血液配对、鉴定,以避免血型间排斥反应。故如何准确鉴定血型、检测交叉配血一直是输血科研究重点。凝聚胺试验(manual polybrene test,MPT)、盐水试管法是目前常用的检测方法,虽有一定诊断价值,然而对不完全抗体难以敏感检出,从而会影响交叉配血结果的准确性及输血安全性。随着医学技术创新、发展,交叉配血研究取得明显进步,微柱凝胶试验(microcolumn gel test,MGT)免疫检测技术由于重复性好、操作简单、结果容易判断,在临床输血科血型鉴定、输血治疗中得到广泛应用[2]。本研究回顾性选取平煤神马医疗集团总医院154例需输血患者,旨在分析MGT免疫检测技术对其血型鉴定符合率及交叉配血成功率的影响。

1 资料和方法

1.1 一般资料选取2019年3月至2021年2月平煤神马医疗集团总医院154例需输血患者进行回顾性研究。其中女75例,男79例;年龄23~54岁,平均(38.21±7.40)岁;输血原因车祸受伤65例,胃癌32例,产后出血42例,慢性贫血15例;输血史无127例,有27例;体质量指数(body mass index,BMI)19~28 kg·m-2,平均(23.45±2.02)kg·m-2。供血标本154例(无偿献血者),其中女74例,男80例,年龄21~43岁,平均(32.18±5.31)岁,BMI 20~27 kg·m-2,平均(23.67±1.56)kg·m-2。(1)纳入标准:①输血者满足输血条件,急需输血,符合交叉配血技术适应证;②临床资料完善,思维正常,可积极配合完成检查及研究;③供血者无食物、药物过敏史,近期无泌尿系统、呼吸道感染史。(2)排除标准:①伴有再生性障碍性贫血、白血病、心肺功能障碍;②合并输血禁忌证;③哺乳期、妊娠期妇女。

1.2 检验方法采用MGT法、盐水试管法鉴定标本血型,以MPT法、MGT法实施交叉配血。仪器:免疫微柱孵育器(长春博迅生物技术公司,FYQ型);血型血清学多用离心机(北京海富达科技有限公司,BY/TD-3A型)。

1.2.1血型鉴定 (1)MGT法:抽取静脉血,离心(3 000 r·min-1)5 min,分离上清液,4 ℃保存,取凝胶微管6支,并进行标记(A、B、C、D、E、F),A~D管加入红细胞悬液(体积分数为5%),E、F管加入已知血型A型、B型的红细胞悬液(体积分数为5%)及血清,离心(3 000 r·min-1)5 min,肉眼比对,判断结果。(2)盐水试管法:常规离心血液标本,分离血清,参考盐水试管法操作流程[3]鉴定血型,离心后观察反定结果,并采用阴性对照管排除冷凝集。

1.2.2交叉配血 (1)MGT法:分离受血者、供血者血标本,配置红细胞悬液(体积分数为1%),取2支凝胶微管,标注为主侧、次侧,主侧微管加入50 μL输血样本及供血者红细胞悬液,次侧微管加入50 μL供血样本及输血者红细胞悬液,孵育(37 ℃)15 min,离心(3 000 r·min-1)5 min,肉眼比对,判断结果。(2)MPT法:离心受血者、输血者血标本,分离血清,配置红细胞悬液(体积分数为3%~5%),标注(主侧、次侧)凝胶微管,主侧加入2滴输血标本和1滴供血者红细胞悬液,次侧加入2滴供血标本和1滴受血者红细胞悬液,并加入低离子介质溶液0.6 mL,混匀后再滴加凝聚胺溶液2滴,再次混匀,15 s后进行离心,取0.1 mL管底凝集液,滴入2滴重悬液,肉眼评价结果。

1.3 观察指标(1)盐水试管法及MGT法血型鉴定结果。(2)MGT法及MPT法交叉配血结果。

1.4 判定标准3 min内判读试验结果视为有效。MPT法:1 min内凝聚胺所致非免疫性凝集散开为匹配,1 min内异体抗体所致免疫性凝集不散开为不匹配。MGT法:凝胶管底部红细胞沉积为匹配;红细胞聚集于凝胶中或凝胶上为不匹配。

1.5 统计学方法采用SPSS 22.0统计软件进行数据处理分析。计数资料以频数和率(%)表示,组间比较采用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血型鉴定结果盐水试管法、MGT法正反定型符合率及不符率比较,差异无统计学意义(P>0.05);见表1。其中8例正反定型不符者中红细胞浓度异常2例,红细胞悬液不新鲜2例,血浆含纤维蛋白4例,占比分别为25.00%、25.00%、50.00%。

表1 不同方法血型鉴定结果[n(%)]

2.2 交叉配血结果MGT法检测交叉配合成功率高于MPT法检测,交叉配血不合率低于MPT法检测(P<0.05)。见表2。2例MGT法检测交叉配血不合患者中,1例因自身抗体所致,1例因不规则抗体所致。

表2 不同方法交叉配血结果[n(%)]

3 讨论

输血治疗在现代医学中占有重要地位,能迅速增加血容量,调节血液循环,改善凝血功能,是纠正休克症状、防治出血性休克的重要措施,可明显降低低血容量死亡风险[4]。但受输血操作、输血次数、个体体质等因素影响,患者极易出现过敏、发热、溶血等不良输血反应。其中溶血反应是一种相对严重的输血反应,受血者自身红细胞输入后若血型抗原缺乏可刺激相应抗体生成,且血型抗体能特异性结合抗原,破坏红细胞致敏,造成血管内溶血,从而引发急性肾衰竭、休克等并发症,甚至可造成受血者死亡[5]。因此选择合适的手段准确鉴定血型,并进行交叉配血检测,在减少输血反应,保证输血安全性方面有积极意义。

盐水试管法是目前常用的血型鉴定方法,准确度较高,已得到临床普遍认可,但其操作复杂、需血量多,难以满足现代医学需求[6]。而MGT免疫检测技术借助凝胶微柱分子层析原理可使小体积红细胞优先穿过凝胶间隙,且能有效结合不规则抗体,从而实现血型鉴定目的;由于其能提高不规则抗体、红细胞结合情况,敏感度良好,故血型鉴定正反定型符合率相对较高,能提升检测准确性[7]。本研究结果显示,盐水试管法、MGT法正反定型符合率及不符率对比差异无统计学意义,提示MGT免疫检测技术血型鉴定敏感度较高,与上述研究一致。另外本研究发现,8例正反定型不符者中红细胞浓度异常2例,红细胞悬液不新鲜2例,血浆含纤维蛋白4例,表明红细胞未彻底离心或浓度过高、细菌污染、悬液不新鲜均会增加MGT免疫检测假阴性、假阳性风险。故检测过程中需有效避免细菌感染,控制红细胞浓度,以提高结果准确性。

MPT法是常用交叉配血检测方法,能迅速得出配血结果,利于临床进行输血治疗,但其操作步骤多,需添加多种溶液,故检测过程相对复杂。有研究表明,MPT法虽对IgG、IgM抗体所致配血不合检测准确性较高,但同时易受肝素及多种药物影响,致使凝集红细胞散开,从而影响结果准确性[8]。而MGT免疫检测技术是基于试剂中抗体与抗体球蛋白特异性结合原理的检测方法,不受低浓度抗体、药物等因素影响,且流程标准化,操作简单,能降低血液样本污染风险,安全性好,检测结果稳定,灵敏度较高[9]。本研究结果显示,MGT法检测交叉配合成功率高于MPT法检测,交叉配血不合率低于MPT法检测,表明应用MGT免疫检测技术能一定程度提升交叉配血配对准度性。MGT法交叉配血不合者自身抗体原因、不规则抗体原因各1例,提示应用MGT免疫检测技术能准确检出输血者、供血者交叉配血不合情况,提高输血安全性。

综上,输血科交叉配血中应用MGT免疫检测技术能准确鉴定血型,检出配血不合现象,有助于降低不良输血反应,提高输血安全性,提升输血科工作质量。

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