韩肖华，陈潞婷,2，李娟，李丹萍，陈红

许多神经系统疾病尤其是神经退行性疾病与不同类型的神经元损伤、减少、死亡有关。如阿尔茨海默病的认知功能障碍与基底前脑的胆碱能神经元有关[1]。随着细胞分化技术的发展，人多潜能干细胞包括人胚胎干细胞和人诱导多潜能干细胞已可以在体外被诱导分化为不同类型的特定神经元和胶质细胞，为神经系统疾病细胞移植治疗提供很好的细胞来源[2]。

内侧神经节隆起（medial ganglionic eminence，MGE）是胚胎发育时期腹侧前脑的一个结构，主要标志物为NKX2.1。研究发现敲除NKX2.1基因可造成基底前脑的CHAT神经元减少，进而导致海马θ节律的改变及学习记忆的严重缺失[3]。CHAT神经元是与认知功能息息相关的一类神经元，在体外分化主要来源于NKX2.1表达的MGE神经前体细胞[4]。目前，MGE的体外分化主要可得到的神经元类型为GABA神经元和CHAT神经元，可以作为治疗和改善学习记忆障碍相关疾病的细胞源。

本研究将对拟胚体（Embryo，EB）悬浮培养法和单层贴壁培养法这2种分化培养方案进行对比研究，以期更经济、有效地诱导人多潜能干细胞分化获得可供移植治疗的MGE区神经前体细胞。

1 材料与方法

1.1 主要试剂与材料

人胚胎干细胞系（H9,P25-55）由华中科技大学同济医学院附属同济医院康复医学科干细胞研究中心提供（美国威斯康星大学麦迪逊分校张素春教授实验室惠赠）。DMEM-F12培养基，N2、B27添加剂，Dispase，Accutase购自Gibco公司；bFGF购自R&D公司；DMH1，SB431542，SAG购自Selleck公司；XAV939购自Stemgent公司；BDNF，GDNF，IGF-1购自Peprotech公司；cAMP，PLO，Triton-X100购自Sigma-Aldrich公司；Laminin购自Invitrogen公司。驴血清购自武汉飞羿科技公司；……