熊慧，戢丹菊，杨家林，刘德洪

（鄂州职业大学医学院，湖北鄂州436099）

随着机体衰老，皮肤生理结构出现功能退化现象，本课题组在前期研究中，提示九龙虫具有抗衰老作用[1]，本实验主要研究九龙虫对D-半乳糖衰老模型小鼠皮肤组织水分、水通道蛋白3、透明质酸、羟脯氨酸、总胶原蛋白、Ⅲ型蛋白的影响。

1 材料与仪器

1.1 动物

清洁级KM 小鼠60 只，体重20±2g，雌雄各半，动物合格证号：42000600015619，许可证号:SCXK(鄂)2015-0018，湖北省实验动物研究中心提供。

1.2 试剂

D-半乳糖，批号：20190523，购自上海喜润化学工业有限公司；九龙虫散，本院自制，用前配成混 悬 液；透 明 质 酸 试 剂 盒 （ELISA），批 号：20200606，购自自上海酶联生物科技有限公司；羟脯氨酸试剂盒（ELISA），批号：20200613，购自自上海酶联生物科技有限公司；皮肤Ⅲ型胶原蛋白试剂盒，批号：20200712，弹性蛋白ELISA 试剂盒，批号：20200723，水通道蛋白3ELISA 试剂盒，批号：202006013，购自南京建成生物工程研究所；维生素E 胶丸，批号：20190724，购自海南养生堂保健品有限公司。

1.3 仪器

渡扬DOR YANG UV759 扫描型紫外可见分光光度计，渡扬精密仪器（上海）有限公司；便携弹性水分油光皮肤测试仪，韩国HUNTKEY 公司；高速离心机，上海卢湘仪离心机仪器有限公司；9602A 酶标仪，南京普朗医用设备有限公司。

2 方法

2.1 动物分组与给药

适应性喂养7 天后，将60 只小鼠随机分为6组：分别为九龙虫高、中、低剂量组、维生素E 组、正常组、模型组。造模，九龙虫高、中、低剂量组、维生素E 组和模型组每日注射半乳糖于小鼠颈背皮下，剂量为120mg/kg，一共42 天，致亚急性衰老模型；正常组每日于小鼠颈背皮下注射等量生理盐水。……