魏毅强 张志强 杨亚莉

溃疡性肠炎(ulcerative colitis，UC)是发病原因不明确的慢性非特异性肠道炎症疾病，经结肠镜检查可见结肠及直肠中的连续黏膜溃疡，病变部位是从直肠向结肠近端扩展，最大范围可蔓延至回肠末端以及阑尾[1]。UC病程较长，易反复发作，常表现为交替出现的活动期和缓解期；结肠镜联合镜下活检是判断该疾病活动度的金标准，但其属于侵入性检查，耗费时间较长、患者痛苦程度大，无法反复进行监测。粪便钙卫蛋白(FCP)含有钙蛋白，是一种炎症标志物，其在粪便中稳定性较强，能够动态反映出UC的活动度；血清髓系细胞触发受体-1(TREM-1)属于免疫球蛋白超家族活化受体，可选择性的表达在中性粒细胞、单核细胞，具有诱导炎性反应的作用，可用于诊断早期炎症反应的灵敏性较高的血清指标[2]。鉴于此，本文旨在观察FCP、TREM-1 水平与UC活动度相关性分析，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取新乡市第一人民医院2019年5月至2020年8月收治的117例UC患者，按照疾病活动程度分为缓解组(n＝58)和活动组(n＝59)。两组年龄、性别、病程等一般资料比较，差异无统计学意义(P＞0.05)，见表1。

表1 两组一般资料比较[(±s)，n(%)]

表1 两组一般资料比较[(±s)，n(%)]

组别 男/女 年龄(岁) 病程(月) 发病部位直肠 乙状结肠 降结肠缓解组33/25 46.00±3.32 11.43±1.47 9(15.52) 20(34.48) 29(50.00)活动组 30/29 45.00±3.32 11.49±1.40 6(10.17) 22(37.29) 31(52.54)t(χ2)值 0.431 0.707 0.097 0.753 P值 0.512 0.488 0.924 0.686

1.2 选取标准 纳入标准：所有患者经临床检查均符合UC诊断标准[3]，首次患病，患者及家属知情。排除标准：伴有心肝肾功能障碍、消化道肿瘤，合并感染性疾病、自身免疫性疾病等，近期接受过非甾体抗炎药物、免疫抑制剂治疗。

1.3 方法

1.3.1 FCP检测 两组患者均接受结肠镜检查，选取2块最严重炎症部位进行病理学检查，由病理实验室医生按照盲法原则对取下的活组织进行检测并诊断。在结肠镜检查前1个星期内，留取10 g粪便，将萃取液加入至标本内，均匀混合后选取5 mL进行离心，取标本上清液进行FCP检测，将FCP试剂解冻，以1∶50比例解冻按照酶联免疫吸附法(ELISA)操作步骤进行检测，使用Thermo赛默飞世尔公司Multiskan GO型酶标仪450 nm波长读取OD值；FCP试剂盒由瑞士Buhlmann公司提供。

1.3.2 TREM-1检测 采集患者空腹静脉血3 mL置于促凝管内，采用医用离心机以3 000 r/min离心10 min，用上海酶联科技有限公司生产的TREM-1试剂盒检测，使用ELISA检测TREM-1水平。具体步骤如下：分别设立空白对照孔、待测样品孔；在酶联包被板上待测样品孔加入1%BSA磷酸盐缓冲液40 μL，再加入10 μL血清；加样完成后放入37 ℃温浴箱内30 min，温浴后将孔内液体弃去，每孔加入30倍浓缩洗涤液静置30 s后弃去，反复洗涤5次，拍干；每孔加入辣根过氧化物酶-抗人IgG复合物50 μL，空白对照孔除外；再温浴30 min后，洗涤5次，拍干；每孔分别加入显色剂A 50 μL，显色剂B 50 μL，轻微震荡混匀，放入温浴箱避光显色20 min；随后每孔加入终止液50 μL，终止反应。随后用Multiskan GO型酶标仪450 nm波长读取OD值。

1.4 观察指标 对比两组患者FCP、TREM-1 水平。分析UC患者FCP、TREM-1水平与疾病活动度相关性。

1.5 统计学方法 采用SPSS 23.0软件进行分析，计数资料以率表示，用χ2检验，计量资料用均数±标准差(±s)表示，用t检验，FCP、TREM-1与疾病活动度相关性采用ROC曲线分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者FCP、TREM-1 水平比较 活动组FCP、TREM-1水平高于缓解组，差异有统计学意义(P＜0.05)。见表2。

表2 两组患者FCP、TREM-1水平比较(±s)

表2 两组患者FCP、TREM-1水平比较(±s)

注：FCP＝粪便钙卫蛋白，TREM-1＝血清髓系细胞触发受体-1。

?组别 例数 FCP(μg/g) TREM-1(pg/mL)缓解组 58 11.72±19.77 50.85±39.69活动组 59 510.43±263.28 146.53±79.99 t值 －14.508 －8.217 P值 ＜0.001 ＜0.001

2.2 FCP、TREM-1诊断UC活动度灵敏度与特异度对比 以ROC曲线上最接近左上角拐点为最佳临界值，FCP最佳临界值为64.03 μg/g，曲线下面积(AUC) 为0.988，其对UC疾病活动度诊断的灵敏度为89.8%、特异度为94.8%；TREM-1最佳临界值为83.54 pg/mL，AUC为0.830，其对UC疾病活动度诊断的灵敏度为84.7%、特异度为86.2%。见图1，见表3。

表3 FCP、TREM-1对UC活动度诊断效能比较

图1 FCP、TREM-1诊断UC活动度ROC曲线

3 讨论

UC发病机制尚不明确，可能与免疫、感染、精神、遗传、环境等因素相关，当人体感染病原体后，循环系统中的自身抗体可与肠壁内病原体相互作用，同时也可杀伤自身上皮细胞，使患者机体内巨噬细胞和淋巴细胞被激活，释放大量血管活性物质及炎症细胞因子，进而加重肠道炎症反应造成肠黏膜受损，导致UC疾病的发作[4]。近些年，体外诊断技术具有较大发展，在肠道黏膜免疫异常引发的炎症反应中发挥重要作用，通过检测相应细胞因子及受体对评估UC活动度具有重要临床价值。

钙卫蛋白(FC)是从中性粒细胞内分离出的杂合性钙结合蛋白，是由一条轻链MRPS与两条重链M非共价结合形成的异二聚体，其在人体组织、细胞和体液中分布较为广泛，是单核巨噬细胞和中性粒细胞内重要蛋白质，其可充分抑制真菌、细菌活性，并参与中性粒细胞防御，在炎症情况下FC浓度升高，不同部位其浓度水平也不同，在粪便中含量大约是血浆的5倍，可充分反映出急性炎症细胞的活化程度；FCP可与钙离子相结合，具有鳌合锌离心能力和抗热性，其在钙离子环境中可起到抗蛋白酶作用，同时在肠腔和外界环境中均不会受到酶和细菌的侵袭，具有较强稳定性[5]。UC疾病活动期中性粒脱颗粒细胞会产生FCP并排至于肠腔，因FCP理化性质较稳定，可抑制肠道细菌降解、消化酶破坏作用，FCP水平与肠腔内中性粒细胞数呈正比。董伟华等[6]研究指出，FCP含量与肠道炎症程度密切相关，粪便内FC主要来源于病变结肠黏膜部位与黏膜内FC含量相一致，其可作为判断UC活动期敏感性指标，与本文研究一致。

TREM-1是与炎症密切相关的新型炎症分子，属于免疫球蛋白家族，其主要表达在单核细胞和中性粒细胞表面，选择性表达于肠液、其他体液的巨噬细胞表面，可加强Toll样受体引发的炎性反应，并放大急、慢性炎症反应。有文献指出[12]，在细菌内毒素作用下可提高炎症细胞表面TREM-1的表达，同时可与TREM-1配体共同激活TREM-1受体向下游方向传递信号，TREM-1被激活后诱发前炎性因子生成并产生相关炎症反应，参与UC疾病的炎症进展。在胃肠黏膜固有层巨噬细胞表面尚未发现TREM-1表达，但在UC患者胃液中TREM-1水平显著提高，是溃疡性肠炎发病的重要因素[13-15]。本研究显示，活动组FCP、TREM-1水平均高于缓解组，与疾病活动度具有显著相关性；根据ROC曲线显示，FCP 对UC活动度特异度和灵敏度分别为94.8%、89.8%，判断疾病活动期最佳临界值为64.03 μg/g；TREM-1对UC活动度灵敏度和特异度分别为84.7%、86.2%，其判断疾病活动最佳临界值为83.54 pg/mL；提示FCP、TREM-1是反映肠道炎症反应的有效标志物。

综上所述，FCP、TREM-1可有效反映出UC患者炎症活动度，具有特异度高、灵敏度高、取样便利，可在短期内重复检测等优点，是动态反映UC患者肠道炎症活动度变化的良好指标，有较高临床价值。