强敏，施晓疌，张楚悦，马培翔，杨光

上海科技大学 免疫化学研究所，上海 201210

组合抗体库（combinatorial antibody library）技术是现代免疫化学的重要组成部分[1-2]。它是一种构建大容量、高多样性的文库，并利用生物进化原理进行优化重组和淘筛的技术。其特征是通过组合策略获得丰富的多样性，将基因型和表型有机整合以实现表型的可复制，并在一个可筛选的体系中将符合所需表型的分子淘筛出来。这一技术可以从B细胞中克隆抗体重链和轻链的基因序列，在体外重组构建抗体基因文库，其多样性高达1011～1012[3]。建立组合抗体库的基本原理是模拟获得性免疫系统的特征，通过基因重排和筛选的策略获得适合的抗体。组合抗体库的生物学特征包括：①可在试管中构建多样性达1011的合成免疫系统；②模拟天然免疫系统基因型与表型相联系的复制系统；③减少传统免疫抗体获得时对活体动物的依赖；④规避免疫耐受问题，可获得识别自身抗原的抗体；⑤包含供者终生完整抗体反应的所有记录；⑥可揭示一些罕见的特殊抗体谱。根据组合抗体库的大小，通过核糖体载体、噬菌体载体、酵母载体、细菌载体、细胞载体等的表面展示抗体，其中噬菌体载体可展示的库容量最大[4]。此外，将抗体分泌表达在细胞质中、锚定在细胞膜上或滞留在内质网膜上等技术，可以进一步拓展组合库的应用范围。根据表面展示抗体形式的不同，组合抗体库分为Fab抗体库、单链抗体（scFv）库和纳米抗体（nanobody）库等。

细胞展示技术巧妙地将组合库抗体的基因型与表型有机整合在一起，而细胞所承载的生物功能决定了可采用的筛选方法[5]。……