王 敏 ，Hideki Hayashi，刘建勋，Norio Takagi*，任钧国

1.中国中医科学院 西苑医院基础医学研究所，北京 100091

2.东京药科大学 应用生化研究室，东京 192-0392

藁本内酯为川芎和当归中的内酯类化合物[1]，具有抗炎、抗氧化应激[2]、改善学习记忆[3]、保护血脑屏障[4]、保护神经元[5]、抗肿瘤[6]等药理作用。中医理论记载，川芎能够“上行头目”，且川芎为临床治疗脑缺血处方中常见配伍药味之一，藁本内酯为川芎挥发油中含量较大的成分[7-8]。研究显示，大鼠po藁本内酯后，其在脑中的分布较其他组织中多，表明藁本内酯具有较好的脑靶向性[9]，在治疗脑相关疾病中具有潜在的优势。

脑缺血后，由于溶栓不及时，瘫痪、偏瘫、失语以及学习记忆障碍等神经损伤症状为脑缺血常见的后遗症，严重影响患者的生活质量和寿命，目前尚无公认的针对缺血后神经修复治疗的制剂上市。神经干/祖细胞（neural stem/progenitor cells，NS/PCs）的增殖对于脑缺血后神经元的修复、神经网络的重构以及后期神经功能的恢复至关重要[10]。本课题组前期研究发现川芎提取物对脑缺血后大鼠体内的神经祖（母）细胞具有增殖作用[11]，本研究拟在此基础上考察川芎中的主要活性成分藁本内酯对体外NS/PCs的增殖作用。

1 材料

1.1 动物

孕14 d Wistar大鼠购自日本SLC公司，饲养于（23±1）℃、湿度（55±5）%的环境中，自由进食饮水。动物实验经东京药科大学动物伦理委员会批准（批准号P20-02）。

1.2 药品与试剂

藁本内酯对照品（质量分数为86%，批号111737-201608）购自中国食品药品检定研究院；β-actin抗体（批号A5441）、Vimentin抗体购自美国Sigma公司；Hank’s平衡盐溶液（Hank’s balanced salt solution，HBSS，批号14175-095）、DMEM/F12培养基（批号11320-033）、B27因子（批号17504-044）购自美国Gibco公司；……