贝母提取物对异丙肾上腺素诱导心肌H9c2细胞肥大的干预作用*
2021-10-25孟天华孙晓慧陶厚权
孟天华, 孙晓慧, 李 乐△, 陶厚权
(1.浙江工业大学药学院2018级研究生; 2. 浙江工业大学药学院, 杭州 310014; 3. 浙江省人民医院中心实验室, 杭州 310014)
心肌细胞肥大(cardiomyocyte hypertrophy,CH)是心肌受激素水平变化或理化刺激时所产生的适应性代偿反应。CH初期,心室壁增厚,心肌收缩功能改善,能保证正常心脏功能。但中后期,CH易导致心肌缺血、心律失常,最终诱发心力衰竭;,其发生机制复杂,己被列为引起心血管疾病发生率和死亡率显著升高的独立危险因素[1]。贝母属植物及其提取物,在抗炎、抗肿瘤、降血压、神经保护、镇痛、抗氧化等方面具有显著的药理活性,尤其是在抗炎方面的效果显著[2]。但其对CH作用的研究,国内外鲜有研究报道,本研究以离体培养心肌H9c2细胞为样本,以异丙肾上腺素(isoprenaline,Iso)诱导CH,通过实验观察贝母提取物(fritillaria extract, FE)对Iso诱导CH的干预作用,旨为FE 将来用于临床提供基础实验资料。
1 材料与方法
1.1 材料、药物
大鼠心肌H9c2细胞株,中科院上海细胞生物所。 FE;批号 170309 ,浙江湖州康成生物公司, 生料比:10:1;Iso , 武汉远程科技公司,批号 170911;青霉素(批号 170512)、链霉素(批号 170314),华北制药厂;胎牛血清(FBS,批号 170212) 华美生物工程公司;DMEM培养基(批号 172318),GIBCO产品;0.25%胰蛋白酶:华美生物工程公司;BCA 蛋白检测试剂盒3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide/3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT),二甲基亚砜(DMSO);结晶紫染液;中国江苏碧云天生物技术公司;钙-4试剂盒,美国MolecularDevices 公司;其他试剂均为国产分析纯。
1.2 主要实验仪器
Vicell 细胞计数仪(Beckman Coulter,美国); 二氧化碳细胞培养箱(Thermo,美国);生物安全柜(ESCO,新加坡);多功能酶标仪(BioTek,美国);-80℃超低温冰箱(Thermo,美国);……
