徐兴军， 李珊珊， 刘 畅， 张伟伟， 张珍珠， 邵淑丽Δ

(1. 齐齐哈尔大学生命科学与农林学院, 黑龙江 齐齐哈尔 161006; 2. 抗性基因工程与寒地生物多样性保护黑龙江省重点实验室, 黑龙江 齐齐哈尔 161006)

近年来全球胃癌患者逐年大幅度增加，且死亡率极高[1]。目前，胃癌最常用的治疗方案仍是以手术加全身化疗为主[2]。然而，近年来研究发现，胃癌对常规化疗药物的耐受性极差，且预后效果不理想[3,4]。因此，迫切需要新的化疗药物。

川楝素(toosendanin, TSN)是一种四环三萜类化合物，从楝树的树皮或果实中提取的无色针状晶体，最初楝树在中国和印度生长，后来转移到世界各地[5]。据报道，川楝素具有杀菌，杀虫，抗炎等功能[6,7]。本实验前期结果表明，川楝素能降低CCNB1和 CCND1基因表达量，使细胞周期阻滞于G1期[8]。然而川楝素对人胃癌MGC-803细胞凋亡的影响及其机制尚不清楚。因此，本实验以MGC-803细胞为研究对象，探讨川楝素诱导胃癌细胞凋亡的作用及其机制，为川楝素的开发利用提供理论参考。

1 材料与方法

1.1 主要试验材料与试剂

人胃癌MGC-803细胞株购自中国医学科学院肿瘤研究所；川楝素粉末购自飞宇生物；血清购自以色列Biological Industries公司；RPMI 1640干粉购自美国Gibco公司；Bcl-2、Bax、Cyt c、APAF、β-actin一抗均购自北京博奥森生物技术公司；羊抗兔和羊抗鼠二抗以及抗体稀释液均购自美国LI-COR公司。

1.2 细胞培养与实验设计

人胃癌MGC-803细胞于CO2细胞培养箱中培养，观察细胞生长状态进行传代。将人胃癌MGC-803细胞分为5组，每组3个复孔，采用氟尿嘧啶(5-FU)和0 nmol/L川楝素(TSN)分别作为阳性对照和阴性对照，其余三组分别加入终浓度为30 nmol/L、50 nmol/L、70 nmol/L的川楝素。……