枯草芽孢杆菌JY24菌株产β-D-葡萄糖醛酸苷酶发酵工艺优化及催化转化
2021-10-25高书锋孔利华曾发姣王升平周小玲刘惠知
高书锋,孔利华,雷 平,曾发姣,王升平,龚 平,周小玲,刘惠知
(湖南省微生物研究院,长沙 410009)
β-D-葡萄糖醛酸苷酶(β-D-glucuronidase,GUSB),是一种糖苷类水解酶,多属于糖基水解酶家族2和79,能催化各类含β-D-糖苷键的化合物水解。当前优化微生物菌株产该酶文献报道较少,Chouiter等[1]对树舌灵芝产β-D-葡萄糖醛酸苷酶培养基和补料方式进行优化,发酵14 d酶活提高5倍,达1.09 U/mL;张斌等[2]对毕赤酵母高效表达重组β-D-葡萄糖醛酸苷酶诱导方法进行了研究,发酵5 d高效表达GAMG的酶活达1 970 U/mL;郭晓晓等[3]对产紫青霉β-D-葡萄糖醛酸苷酶的诱导表达进行了研究,初始葡萄糖耗尽时,继续诱导3 d和发酵2 d,酶活达2 356 U/mL,提高近3倍;吴文婷[4]对ChaetomiumglobosumS108菌株产β-D-葡萄糖醛酸苷酶工艺进行了研究,发酵4 d酶活达900 U/mL;Ku等[5]对德氏乳杆菌Rh2产β-D-葡萄糖醛酸苷酶的66种培养基优化筛选,厌氧发酵18 h,相对酶活提高8倍。上述优化微生物菌株产该酶文献报道所用菌种多属真菌,代谢产酶周期较长,为4 d至14 d,而德氏乳杆菌Rh2虽为细菌菌株,但产酶发酵方式为厌氧发酵,实际生产有一定困难。当前有关好氧细菌产该酶的发酵工艺优化研究尚未见报道,加之细菌具有代谢产酶周期短的优势,因此,有必要针对本实验室前期试验从健康鸡肠道选育的产β-D-葡萄糖醛酸苷酶的饲用枯草芽孢杆菌JY24菌株,开展产酶发酵工艺优化,为后续工作中提升黄芩苷转化率和转化效率提供借鉴和理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 菌种
枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)JY24菌株,湖南省微生物研究院动物营养与疫病防控室分离选育保存。……
