孟 琳，陈良标

(1.海洋生物科学国际联合研究中心(上海海洋大学)中国科学技术部，上海201306；2.水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室(上海海洋大学)，上海201306；3.水产科学国家级实验教学示范中心(上海海洋大学)，上海201306)

血红蛋白是一种由多肽链或4个附属单元组成的大分子蛋白质，在某些低等动物中以游离状态存在，在人类中存在于红细胞中，是血液不可缺少的成分，最重要的功能是将氧气运送到全身各处[1-2]。血红蛋白异常会引起多种血红蛋白分子病，如镰形细胞贫血症和地中海贫血症等[3-4]，且糖化血红蛋白与糖尿病和心血管疾病有密切关系[5-6]。血红蛋白水平下降会造成生物体心力衰竭，严重损坏机体[7]。但是经过研究发现，南极水域中的一种生物体-冰鱼Chionodracohamatus体内完全不含有血红蛋白，只靠鳃和皮肤吸收水中的溶解氧，却可以在水中正常生活[8-10]。这种自然突变体生物的存在，为实验室构建血红蛋白缺失突变体提供了可行性。

与ZFN和TALEN基因编辑手段相比，CRISPR/Cas9基因编辑系统更高效[11-12]，几乎可以准确编辑基因组中任何一个位点，被广泛应用于动植物等模式生物中[13-15]。斑马鱼(Daniorerio)是一种常见的小型淡水鱼，具有许多得天独厚的优点：如体积小，便于饲养；进行体外受精，易于得到受精卵；产卵多，一次可多达几百颗；受精卵透明度清晰可见，便于观察发育情况；达到性成熟时间短等，是一种适合研究基因功能的理想模式生物[16-17]。

目前NCBI上有14个已知的斑马鱼血红蛋白基因，可分为α亚型和β亚型两种类型，分布在3号和12号染色体上，这些基因有些调控斑马鱼胚胎期血红蛋白的生成，有些调控斑马鱼成熟期血红蛋白的生成。……