郑 辉 陈文丽 蔡 昆 张明芬 李 飞

甲状腺癌中最常见的病理类型是甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinoma，PTC），高分辨率超声是诊断甲状腺癌最有效的检查方法。超声弹性成像作为一种评估组织弹性的方法，其相关参数应变率比值（strain ratio，SR）和弹性评分对甲状腺良恶性结节的鉴别诊断具有较高价值［1］。程序性细胞死亡基因4（programmed cell death gene 4，PDCD4）是一种肿瘤抑制基因，参与肿瘤的发展［2］；表没食子儿茶素没食子酸酯（epigallocatechin gallate，EGCG）可以调节多种细胞信号转导和代谢途径，包括在不同的癌细胞中抑制生长、转移、侵袭和诱导凋亡［3］；Xklp2靶蛋白（Xklp2 target protein，TPX2）是一种微管相关的蛋白，现已被证实与肿瘤的发生发展、凋亡周期等密切相关，在一定程度上可以抑制肿瘤细胞的凋亡通路，促进其增殖分化［4］。本研究旨在探讨PTC的超声弹性成像特征及其与PDCD4、EGCG、TPX2表达的相关性。

资料与方法

一、临床资料

选取2018年1月至2020年10月在我院手术经病理确诊的86例甲状腺结节患者，男34例，女52例，年龄28～69岁，平均（42.58±9.21）岁，结节直径1.1～3.9 cm，平均（2.37±1.04）cm。所有患者均为单发病灶，其中PTC组49例，良性肿瘤组37例；良性肿瘤组中甲状腺腺瘤25例，结节性甲状腺肿12例。纳入标准：①均为初次发现甲状腺结节；②均经手术病理证实；③临床资料完整。排除标准：①无手术适应证者；②合并严重心脏、肝肾功能不全；③有其他甲状腺相关疾病治疗史。两组一般资料比较差异均无统计学意义，具有可比性。本研究经我院医学伦理委员会批准，所有患者均知情同意。

二、仪器与方法

1.仪器：使用迈瑞Resona 8T彩色多普勒超声诊断仪，探头频率4～15 MHz；配备弹性成像技术及定量分析软件。

2.超声检查：患者取仰卧位，充分暴露颈部，先常规扫查甲状腺区域并观察病灶，嘱患者屏气约3～5 s，切换为弹性成像模式，待图像稳定后在病灶区域选择感兴趣区（ROI），大小设定为病灶区域的2/3或以上。探头适当施压，使显示屏上压力指标稳定在3～4。通过双幅实时显示功能观察二维图像与弹性图像，计算结节的弹性评分和SR。所有检查均由两名具有10年甲状腺超声检查经验的医师在不知病理结果的情况下完成，意见不一致时共同协商。超声弹性评分标准［5］：①病灶显示为红绿蓝相间记0分；②病灶与周围组织显示均为绿色记1分；③病灶显示为绿色，而周围部分组织显示为蓝色记2分；④病灶显示为蓝色，而周围部分组织显示为绿色，或蓝绿相间，红蓝比例为1∶1记3分；⑤病灶基本显示为蓝色记4分。0～2分判为良性结节，3～4分判为恶性结节。

3.实验室检查：采用琼脂糖凝胶电泳法进行鉴定，选择βactin为mRNA的内参作为对照，以PCR标准曲线计算PDCD4、EGCG和TPX2的相对表达量。

三、统计学处理

结 果

一、两组弹性评分和SR比较

PTC组弹性评分和SR均高于良性肿瘤组，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。见表1和图1，2。

表1 PTC组与良性肿瘤组弹性评分、SR比较（±s）

表1 PTC组与良性肿瘤组弹性评分、SR比较（±s）

SR：应变率比值

组别PTC组良性肿瘤组t值P值弹性评分3.56±0.57 2.11±0.23 16.151 0.000 SR 4.83±1.89 1.53±0.68 11.293 0.000

图1 PTC组一46岁男性患者常规超声和弹性成像图

图2 良性肿瘤组一35岁女性患者常规超声和弹性成像图

二、两组实验室参数比较

PTC组PDCD4、EGCG表达均低于良性肿瘤组，TPX2表达高于良性肿瘤组，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。见表2。

表2 PTC组与良性肿瘤组实验室参数比较（±s）

表2 PTC组与良性肿瘤组实验室参数比较（±s）

PDCD4：程序性细胞死亡基因4；EGCG：表没食子儿茶素没食子酸酯；TPX2：Xklp2靶蛋白

组别PTC组良性肿瘤组t值P值PDCD4 81.35±9.12 105.26±12.97 9.569 0.000 EGCG 59.81±7.69 83.72±11.27 11.100 0.000 TPX2 98.61±12.47 71.58±8.13 12.137 0.000

三、相关性分析

Pearson相关分析显示，PTC组弹性评分、SR与PDCD4、EGCG表达均呈负相关（均P＜0.05），与TPX2表达均呈正相关（均P＜0.05）。见表3。

表3 PTC组弹性评分、SR与PDCD4、EGCG、TPX2表达的相关性

讨 论

PTC是甲状腺癌中最常见的一种，其总体预后良好，患者术后10年平均生存率为93%［6］。二维超声可区分囊性结节与实性结节，能观察结节形态，但其准确鉴别良恶性结节仍有局限［7］。组织弹性是评估恶性肿瘤风险的一项重要指标，超声弹性成像可以估测组织弹性，并比较不同组织的硬度。与软结节相比，硬结节在施加压力时不易变形（即弹性较小）。与良性结节比较，恶性结节较硬，故其弹性较低。因此，超声弹性成像不仅可提供常规超声的图像特征，还能通过测组织弹性对甲状腺结节的良恶性进行鉴别诊断。

本研究结果显示，PTC组弹性评分、SR均高于良性肿瘤组，差异均有统计学意义（均P＜0.05），导致这一结果的最重要因素是结节中基质成分不同。研究［1］表明，基质中的胶原蛋白越多，SR越高。PTC中具有侵袭性行为的肿瘤细胞会导致更复杂的基质反应，而基质反应会导致胶原蛋白重构，将正常的柔性纤维转变为高风险的硬质对齐的胶原蛋白，可能使结节较硬。与PTC相比，甲状腺腺瘤和结节性甲状腺肿基质中的胶原蛋白表达少，且大多良性结节生长缓慢，组织细胞无侵袭性，故基质反应弱，结节较软。另一原因为PTC可以包含许多胶原蛋白轴，可能使结节变硬。另外，钙化也是弹性成像的重要影响因素，在具有不同钙化类型的PTC中，存在基质钙化结节的SR更高。

本研究结果还显示，PTC组与良性肿瘤组的相关增殖基因表达差异均有统计学意义（均P＜0.05）。PDCD4与肿瘤发生和进展相关，在肺癌小鼠模型中，PDCD4的升高可诱导细胞凋亡，抑制细胞增殖和肿瘤血管生成［8］。另有研究［9］表明，肿瘤抑制蛋白PDCD4通过与翻译起始因子4A结合，抑制其RNA解旋酶活性，从而抑制蛋白的翻译。表明PDCD4作为一种肿瘤抑制基因，在PTC的发生、发展过程中发挥抑制作用。同样，EGCG是绿茶中含量最丰富、最具生物活性的儿茶素，可抑制多种类型癌细胞的生长、转移、侵袭和诱导凋亡，能抑制人PTC细胞株的增殖和活性［10］。本研究结果证实了PDCD4和EGCG在PTC中呈低表达。相反，TPX2属于一种微管相关蛋白，其表达水平可提示PTC细胞的增殖能力，在一定程度上反映细胞分化与凋亡的失衡，进一步促进肿瘤的发生发展；此外，TPX2也能抑制肿瘤细胞的凋亡通路，使肿瘤细胞的凋亡受阻。本研究结果也证实TPX2在PTC中呈高表达。

本研究还对PTC患者弹性评分、SR与PDCD4、EGCG、TPX2表达的相关性进行分析，结果发现弹性评分、SR与PDCD4、EGCG表达均呈负相关，与TPX2表达均呈正相关（均P＜0.05），说明PTC弹性评分、SR与甲状腺结节的恶性增殖具有一定关系。因此，通过测量PTC的弹性评分和SR可在一定程度上反映细胞恶性增殖的生物学行为，进一步说明超声弹性成像对甲状腺结节良恶性的鉴别诊断具有一定价值。

本研究局限性：①仅选取甲状腺良恶性结节的相关增殖基因；②样本量较少，今后需增加样本量及其他相关指标进一步分析。

综上所述，PTC与甲状腺良性肿瘤的弹性评分和SR有显著差异，PTC弹性评分和SR与PDCD4、EGCG、TPX2的表达均相关，可在一定程度上反映PTC的恶性生物学行为，对临床鉴别诊断甲状腺结节良恶性有重要价值。