陈 浩， 李慧利， 杜 亮， 周长浩， 陈 欢， 王 欣

（河北医科大学第一医院麻醉手术科，河北石家庄 050031）

脓毒症由感染引发，患者全身发生有害反应，会出现低血压、恶病质和发热等症状，严重影响生命安全，危害严重［1］。脓毒症会导致炎症因子和自由基增多、出现线粒体损伤等，这些情况均导致细胞自噬增多，而自噬在脓毒症中发挥重要调节作用［2］。蛋白激酶B（protein kinase B，PKB/Akt）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）自噬通路作为上游通路汇合点，在脓毒症大鼠中对于自噬调控发挥重要作用［3］。脓毒症中激活自噬可以抑制炎症反应，从而减少细胞死亡，减轻患者症状［4］。右美托咪定（dexmedetomidine，DEX）作为α2受体激动药物，对脓毒症患者有保护作用，可降低28 d死亡率和缩短机械通气时间［5］，但作用机制尚需进一步探讨。因此，本研究采用盲肠结扎穿孔术（cecal ligation and puncture，CLP）建立脓毒症大鼠模型，探究DEX 对自噬及核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3，NLRP3）炎症小体的作用，以期寻找DEX缓解脓毒症的机制。

材 料 和 方 法

1 动物

50 只SPF 级雄性Wistar 大鼠，10 周龄，体质量（200±10）g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，生产许可证号为SCXK（京）2016-0011。所有大鼠均在温度（23.5±0.5）℃、湿度（50±5）%、12 h黑暗/12 h 光照条件下自由饮水摄食，暂养1 周后进行实验，实验动物符合3R 原则。本研究经河北医科大学第一医院动物伦理审查委员会审核并通过。

2 主要试剂

盐酸DEX注射液（江苏恒瑞医药股份有限公司；国药准字H20090248；规格：2 mL、200 μg）；PI3K/mTOR 抑制剂NVP-BEZ235（MedChemExpress；规格：200 mg；纯度：99.68%）；自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤（3-methyladenine，3-MA；Sigma；规格：100 mg）；苏木素-伊红（hematoxylin-eosin，HE）染色试剂盒（北京索莱宝科技有限公司）；……