张海莲，陈晓，王玉团

(1.菏泽市立医院，山东 菏泽 274031；2.山东省食品药品检验研究院，山东省食品药品安全检测工程技术研究中心，山东 济南 250101)

鹿角始载于《神农本草经》，列为上品，为鹿科动物马鹿(CervuselaphusLinnaeus)或梅花鹿(CervusNipponTemminck)已骨化的角，分别习称马鹿角和梅花鹿角，功能为温肾阳，强筋骨，行血消肿[1-2]，临床上主要用于治疗人体肾阳虚衰之症，因疗效非常确切，故应用广泛。

目前对鹿角的研究主要集中在蛋白酶解工艺及蛋白和多肽药理作用方面[3-4]，也有微量元素分析[5-7]、多糖测定[8]和氨基酸分析[9]等方面的研究报道，但对鹿角的生物活性成分蛋白质组成方面的研究较少。利用蛋白质组学技术对鹿角中主要蛋白质进行结构分析与种类确认，可以明确鹿角的主要蛋白质组成。试验中采用蛋白变性溶液对鹿角进行处理，再用胰蛋白酶酶解，然后通过超高效液相-高分辨质谱联用仪进行多肽分离及质谱数据采集，最后选择目标蛋白质数据库进行比对，得到鹿角中蛋白质及多肽的信息[10]。

1 仪器与材料

1.1 仪器 超高效液相色谱仪Ultimate 3000联用Fusion-Orbitrap高分辨质谱仪(Thermo 公司)，XSE205电子天平(赛多利斯科学仪器有限公司)。

1.2 材料 Millipore 10 K超滤管；胰蛋白酶(Sigma公司，批号：SLBG6452V)；马鹿角、梅花鹿角[安国药材市场王兵要鹿茸铺提供，产地为黑龙江省伊春市，经山东中医药大学彭艳丽教授鉴定，分别为鹿科动物马鹿(CervuselaphusLinnaeus)和梅花鹿(CervusNipponTemminck)已骨化的角，编号分别为DWY-MLJ-03和DWY-MHLJ-03]；盐酸胍、三羟甲基氨基甲烷(Tris)、乙二胺四乙酸二钠(EDTA二钠)、二硫苏糖醇(DTT)、碘代乙酰胺(IAA)、碳酸氢铵均为分析纯；……