肖文斐， 柴伟国， 忻雅， 来文国， 阮松林， 裘劼人

(杭州市农业科学研究院，浙江 杭州 310024)

葡萄汁多味美、营养丰富，是我国的主要果品之一，也是杭州地区的主栽水果。目前，杭州市葡萄种植面积约为1 300 hm2[1]。葡萄炭疽病是一种分布广泛的重要病害，给生产带来巨大损失[2-3]。引起葡萄炭疽病的病原主要为胶孢炭疽菌，存在丰富的遗传多样性，不同地区、不同栽培条件下菌落形态、菌落生长速率、产孢量、致病力等差异显著[4-6]。因此，本研究通过对杭州地区葡萄炭疽菌的分离和生物学特性的分析，为当地该病害防治提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 病原菌的分离与鉴定

在杭州市临安区横街村葡萄园采集具有葡萄炭疽病典型病症的叶片和果实，用自来水洗净表面，再用75%乙醇消毒1 min，1%次氯酸钠消毒10 min，无菌水冲洗3遍，置于无菌滤纸上吸干表面水分。切取叶片或果实病健交界处无明显病变的组织，于马铃薯葡萄糖培养基上25 ℃黑暗培养。培养5 d后，用无菌接种针挑取平板上菌丝及分生孢子进行显微观察，拍照记录菌落数量及孢子生长状态。将鉴定正确的菌株在马铃薯葡萄糖培养基上纯化培养，用于后续生物学特性研究。

1.2 不同培养基对菌落生长及产孢的影响

配置马铃薯葡萄糖培养基、马铃薯蔗糖培养基、葡萄糖蛋白胨培养基、蔗糖蛋白胨培养基、酵母葡萄糖产孢培养基共计5种培养基。在无菌条件下用打孔器将纯化培养7 d的病原菌打成直径为5 mm的菌饼，接种到不同营养类型培养基上，每个处理设置3个重复，置于25 ℃恒温条件下培养。……