欧阳欢， 熊遂金， 陈健美， 钟八莲

(赣南师范大学 生命科学学院，江西 赣州 341000)

以柑橘黄龙病为代表的柑橘病害，对我国乃至全球柑橘产业的健康持续发展造成了严重的影响。目前，全球已发现80余种柑橘病毒类病害，而在我国已超过15种柑橘病毒及类病毒被报道[1-2]。胚性愈伤组织是利用柑橘珠心胚脱毒及原生质体融合等生物技术育种的重要材料。柑橘珠心胚主要由珠心胚原基细胞发育而成，它们起源于珠心组织珠孔端的一两层细胞内，在珠孔到珠心的中间、胚囊边缘第1层及邻近珠被的珠心外表皮甚至合点端有时也偶尔存在珠心胚原基细胞，珠心胚原基细胞的细胞核大，细胞质浓厚，明显区别于其他细胞，并形成厚细胞壁将其与周围珠心组织隔离开来[3]。病毒通常是经过维管束的韧皮部传播的，而珠心与维管系统无直接联系，由珠心细胞诱导发生的植株可以免除病毒的危害[4]。但珠心胚大多是不育的，必须分离培养才能发育成正常的幼苗。Navarro等[5]用组织培养的方法，从单胚性的克里曼丁橘上培养出了无病毒的良种珠心苗。高峰等[6]对华盛顿脐橙的未受精胚珠进行离体培养获得了脱去裂皮病和衰退病的无病毒珠心苗。对于具有多胚性的柑橘品种来说，珠心胚可取自种子中的非合子胚，但是对于单胚性或无籽的柑橘品种，珠心胚只能通过未受精胚珠进行离体组织培养来获得。本研究是在组织培养的基础上，以赣南早脐橙、纽荷尔脐橙、哈姆林甜橙不同发育时期果实的未受精胚珠为外植体，通过比较不同取样时间及诱导培养基下的未受精胚珠愈伤诱导率和胚性愈伤诱导率，以期建立一个高效的甜橙胚性愈伤组织诱导体系。……