李天祎， 杨 扬， 万珊杉， 杨素萍， 李嘉琦， 王家平

慢性肾病（chronic kidney disease，CKD）发生率近年来逐渐增高，我国约有成年患者1.2 亿，患病率高达10.8%，患者经济负担也越来越重［1］。 多项研究表明肾脏免疫介导性炎症是CKD 重要致病因素之一。 目前CKD 治疗手段有限， 仅能延缓肾衰竭进展，达不到根治目的，寻找特异性治疗方法成为亟待解决的问题［2］。 转化医学与再生医学不断兴起，为治疗提供了新思路。 骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cell，BMSC）作为再生医学源于中胚层的未分化成体干细胞，具有定向分化为成骨细胞、脂肪细胞等潜在能力，并可通过抑制氧化应激、减少细胞凋亡、促进新毛细血管形成和抑制炎性反应、刺激内源性再生等，减轻肾损伤并促进受损肾组织重构［3］。 目前，BMSC 主要通过尾静脉和肾动脉移植，不同移植方法会对BMSC 归巢数量产生影响，对肾组织修复效果也会产生差异。 本研究旨在评价经肾动脉移植BMSC，对阿霉素CKD大鼠受损肾脏的修复作用及对肾脏炎症的影响。

1 材料与方法

1.1 实验动物与材料

37 只健康清洁级16 周龄雄性Sprague- Dawley（SD）大鼠（购自昆明医科大学实验动物中心），体质量250～300 g，其中2 只4 周龄，用于分离BMSC。胎牛血清（FBS）、低糖培养基（L- DMEM）购自美国Gibco 公司，阿霉素购自美国Sigma 公司，肝素由实验室配置，苏木精- 伊红（HE）染色试剂盒、青链霉素双抗和0.25%胰蛋白酶- 乙二胺四乙酸（EDTA）消化液购自北京索莱宝科技公司，CD3、CD20 单体购自英国Abcam 公司。

1.2 BMSC 分离和培养

2 只4 周龄大鼠脱颈处死， 置于75%乙醇溶液中浸泡10 min，0.9%氯化钠溶液冲洗干净， 于超净台下分离双侧胫骨和股骨，剪去两侧骨骺端，磷酸缓冲液（PBS）冲洗骨髓腔3～5 次，至其变白；……