丁 丽，赵继俊，陈志浩，蒋锦锋，叶长文，陈 宸，贺 琛，赵 阁

（中国烟草总公司郑州烟草研究院，河南 郑州 450001）

烟碱（Nicotine，NIC）是烟草中的主要生物碱，约占烟草生物碱总量的90%以上。卷烟抽吸时，约有40%的烟碱直接转移至卷烟的主流烟气和侧流烟气中［1］。人类吸入烟气后，烟碱主要代谢为可替宁（COT）以及少量的烟碱氮氧化物（NNO）、降烟碱（NNIC）和烟碱糖苷（NIC－G）。COT进一步代谢为反-3′-羟基可替宁（OHCOT）、可替宁氮氧化物（CNO）、可替宁糖苷（COT－G）和降可替宁（NCOT）。OHCOT可进一步代谢为反-3′-羟基可替宁糖苷（OHCOT－G）。此外，人尿液中还有其他烟碱代谢物，但仅占烟碱代谢物总量的10%以下［2］。因此，同时测定人尿液中烟碱及其代谢物能有效评估烟碱的暴露情况［3］。

光度法［4－6］、免疫法［7－8］和色谱法［9－16］已被应用于人体体液中烟碱及其代谢物的测定。其中，气相色谱－质谱法和液相色谱－质谱法由于其优越的灵敏度和选择性而被广泛应用于人体体液中烟碱及其代谢物的测定。NIC和COT主要采用气相色谱－质谱法［9－12］直接检测，OHCOT需经衍生化后由气相色谱－质谱法检测，糖苷类（COT－G和OHCOT－G）主要通过气相色谱－质谱间接测定由β-葡萄糖苷酶水解后的苷元得到其含量［9，11］。液相色谱－质谱法更便捷，可直接用于烟碱代谢物，包括糖苷类代谢物的测定［13－18］。本课题组曾报道了一种液相色谱－质谱法检测尿液中烟碱及其9种代谢物的方法［13］，尿液用水稀释后直接进样，然而由于COT－G在反相柱中保留较弱，出峰较早（保留时间为1.96 min），基质效应影响大，导致尿液样品中该峰的峰形差。因此，本文尝试用亲水作用色谱分离烟碱及其代谢物以改善COT－G的分离度，提高质谱检测的灵敏度。……