王佳敏

（肇庆医学高等专科学校 广东 肇庆 526000）

B群链球菌（group b streptococci, GBS），寄生于人下消化道及泌尿生殖道，新生儿GBS感染与母亲生殖道GBS定植关系密切[1]，可引起新生儿肺炎、脑膜炎、败血症，甚至死亡[2]。按照GBS荚膜多糖抗原成分特异性不同，可分为Ⅰa、Ⅰb、Ⅱ～Ⅸ等10种血清型[3]。本研究对临床分离的GBS进行血清学分型和多位点序列分型（multilocus sequence typing, MLST），研究东莞地区GBS的流行病学资料，为实施GBS产前筛查和抗生素预防提供依据。

1.资料与方法

1.1 一般资料

收集2019年1月—2020年1月东莞东华医院门诊及病房孕产妇细菌培养分离的GBS共91株。分离菌株参照文献[4]进行标本的采集、接种和培养，并用VITEK-2全自动微生物分析系统鉴定为GBS。

1.2 血清学分型

使用GBS荚膜抗体进行血清学分型，操作步骤及判读方法参考文献[5]。若菌株与10种分型血清均不发生凝集，定义为不可分型（non-typeable, NT）。

1.3 MLST分型及溯源分析

使用试剂盒提取DNA，参照Jones等[6]建立的MLST分型方案，将7个管家基因进行PCR扩增，扩增产物委托广州生物工程公司进行测序，将测序结果提交到MLST分型数据库确定序列型（sequence type, ST）。用eBURSTv 3.0程序确定克隆群（clonal complexes,CCs）。若7个管家基因中至少有6个是相同的，就认为是同一个CCs[7]。

2.结果

2.1 GBS的血清型

91株GBS分离得到6种血清型，分别为Ⅰa型16株、Ⅰb型12株、Ⅲ型49株、Ⅴ型8株，血清型Ⅵ和Ⅶ各1株，另外有4株GBS为不可分型（NT），见表1。

2.2 MLST分型及溯源分析

经MLST分型和eBURSTv 3.0程序分析91株GBS的分子型，共得到5个克隆群和5个单独序列型（singletons,S），见表1。

表1 91株GBS菌株的序列型与血清型的关系

2.3 多位点序列型与血清型关系

本研究有6种血清型，5种克隆群。66.7%的CC19克隆群菌株和54.5%的CC17克隆群菌株为学清型Ⅲ型，55.6%的CC12克隆群菌株为Ib型；……