邓顺美 马春杰 庞 韬 王奇玲 刘晓华 唐雨倩 李倩仪 朱胜辉 李月华 张欣宗

广东省计划生育科学技术研究所 国家卫生健康委员会男性生殖与遗传重点实验室(广州，510600)

人类精子冷冻保存是人类精子库工作的重要组成部分。由于场地空间成本限制，大多数冷冻精子标本在液氮罐中处于集中保存状态。在发放精液过程中，不可避免的会有一些非待发精液标本连同待发精液标本一起暴露于空气中，导致几秒至几分钟的短暂冻融。目前有关人精子冷冻保存发放过程中连带暴露导致短暂冻融对复苏后前向运动精子(PR)复苏率的影响鲜见报道。本文以世界卫生组织(WHO)推荐使用的甘油-卵黄-柠檬酸盐(GEYC)冷冻保护剂为人精子冷冻保护剂[1]，检测对比连带暴露时间长短对PR精子冷冻复苏率的影响。

1 对象与方法

1.1 研究对象

40份精液标本来自10例于广东省人类精子库捐精志愿者。捐精者职业以学生为主，年龄22～45岁。精液筛查标准及捐精要求符合卫生部2003 年颁布的《人类精子库基本标准和技术规范》[2]的要求。

1.2 分组

将精液标本按照每次室温(26℃)暴露时间分为1min组、2min组、4min组、对照组(未暴露于室温)。

1.3 精液准入标准

精液液化时间≤60min，精液量≥2ml，精子浓度≥60×106/ml，PR精子百分率≥60%[2]。

1.4 研究方法

1.4.1标本收集与精液分析研究对象均禁欲3～5d，手淫法收集精液于无菌容器中，37℃恒温水浴箱中温育完全液化，计算机辅助精子分析方法进行精液常规分析,包括精子浓度、PR精子百分率(%)等。

1.4.2精液冷冻及复苏每份……