◎ 王一萍，段林洁，曾杰生，刘华敏，王 哲

（广东顺德工业设计研究院（广东顺德创新设计研究院），广东 佛山 528000）

食品安全关系民生大计，食源性致病菌是引发食品安全问题的主要因素[1-2]，其中副溶血弧菌和鼠伤寒沙门氏菌最为常见[3-4]。副溶血性弧菌是一种嗜盐性革兰氏阴性菌，常存在于海虾、鱼、牡蛎等海产品中[5-6]，食用携带该菌的食物常会引起急性肠胃炎等食物中毒现象。沙门氏菌是一种革兰氏阴性菌，在全球食物中毒病例中的分离率最高，常存在于蛋类、肉类中[7-8]。感染沙门氏菌后会引起肠道炎，在极端情况下可能引发系统感染[9]。目前，常规的检测技术主要有显色培养基技术[10]、荧光定量PCR检测技术、胶体金技术[11]、免疫层析试纸条[12]和Southem Blot杂交技术等[13-15]，这些方法各有优缺点[16]，但均不能有效实现绝对定量。数字PCR技术[17]作为新一代的PCR技术，可实现单分子绝对定量[18-19]，其通过对样本的有限稀释，将待测样本均匀分配到微反应单元中，扩增后读取每个微反应单元的终末荧光信号，结合泊松分布统计原理，能够对起始模板分子绝对定量，目前广泛应用于病毒检测[20-21]、癌症诊断和治疗、食品成分分析[22-23]和食源性致病菌的检测[24-27]等方面。一种有效可靠的检测方法对保障食品安全和人们健康起着至关重要的作用，本文首次采用非特异性核酸染料Eva Green建立双重ddPCR（数字PCR）体系，以实现同时检测食品中的副溶血弧菌和鼠伤寒沙门氏菌，提高检测方法的灵敏度。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

牡蛎，市购；……