李梦秋，黄 娟，邹国发，李坤平，冯毅凡，明 露，高振虎，陈艳芬

(广东药科大学 1.中药学院、2.中医药研究院、3.新药开发中心，广东 广州 510006)

高良姜是姜科植物高良姜(AlpiniaofficinarumHance)的干燥根茎，产于中国东南部(广东、广西、海南)，性热、味辛，温胃止呕、散寒止痛，临床常用于治疗脘腹冷痛、嗳气吞酸、胃寒呕吐等消化系统疾病。研究表明，高良姜具有明显的镇痛作用，除了胃痛腹痛，对原发性痛经等疼痛也具有显著疗效[1-2]。尽管在体内研究中已经证实了高良姜的镇痛作用，但其潜在的镇痛作用的分子机制仍不清楚。瞬时受体电位通道蛋白1(TRPA1)是瞬时受体电位(transient receptor potential，TRP)超家族的一员，是一种对钙离子具有高通透性的非选择性阳离子通道，通常在小直径的初级传入神经纤维中表达，与感知外界伤害性刺激相关，可被各种外源性刺激物激活，如有害的低温、芥子油中的异硫氰酸烯丙酯、过氧化氢和不饱和醛等内源性反应物质[3]。研究表明[4]，TRPA1通过感觉神经激活参与痛觉和炎性疼痛的感知，TRPA1通道的激活可增加细胞内Ca2+浓度，最终导致伤害性或伤害性反应。因此，以TRPA1为目标蛋白成为开发新型镇痛药的研究热点。在前期研究中，我们采用脂质体转染法构建了稳定表达TRPA1通道的HEK-293T细胞系[5]。本研究采用TRPA1-HEK293T细胞模型，体外研究高良姜是否对TRPA1表达具有调节作用，以期阐述中药高良姜温中止痛的作用机制。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

1.1.1细胞株 人胚肾(HEK-293T)细胞，采用脂质体转染法将TRPA1真核表达质粒转入HEK-293T细胞中，构建稳定表达TRPA1通道的TRPA1-HEK293T细胞株。……